El tipo de medio utilizado en el cultivo de células madre depende del tipo específico de células madre que se estén cultivando. Aquí hay algunos tipos de medios comunes:

Células madre embrionarias (ESCs):

• mTeSR1 o mTeSR Plus: Medio definido, sin suero para células madre embrionarias humanas
• KnockOut™ DMEM/F-12: A menudo suplementado con KnockOut™ Serum Replacement, FGF básico (bFGF) y otros aditivos

Células madre pluripotentes inducidas (iPSCs):

• Essential 8™ Medium: Medio químicamente definido, libre de xenogénicos
• TeSR-E8: Otro medio definido, libre de xenogénicos para iPSCs humanas

Células madre mesenquimales (MSCs):

• DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle Medium): A menudo suplementado con 10-20% de suero fetal bovino (FBS), L-glutamina y antibióticos
• α-MEM (Alpha Minimum Essential Medium): También suplementado de manera similar a DMEM

Células madre neurales (NSCs):

• Neurobasal™ Medium: Suplementado con B-27, suplementos N-2, EGF y bFGF
• DMEM/F-12: Suplementado con N-2, B-27 y factores de crecimiento

Células madre hematopoyéticas (HSCs):

• StemSpan™ SFEM: Medio de expansión sin suero, a menudo suplementado con citocinas y factores de crecimiento específicos

Células madre cardíacas:

• RPMI 1640: A menudo suplementado con B-27 y otros factores específicos

Estos tipos de medios suelen ser suplementados con factores de crecimiento específicos, citocinas y otros aditivos dependiendo de los requisitos exactos de las células madre que se estén cultivando.

El cultivo de células madre puede ser desafiante debido a sus requisitos específicos y su sensibilidad a las condiciones ambientales. Aquí hay algunos factores que contribuyen a la dificultad:

• Esterilidad: Mantener un ambiente estéril es crucial para prevenir la contaminación, lo cual puede ser más desafiante debido a la manipulación frecuente y los cambios de medio necesarios
• Requisitos nutricionales: Las células madre a menudo requieren nutrientes específicos, factores de crecimiento y suplementos adaptados a su tipo (por ejemplo, bFGF para células madre pluripotentes)
• Recubrimiento de superficie: La adhesión y el crecimiento adecuados a menudo requieren el recubrimiento de las superficies de cultivo con proteínas de la matriz extracelular como Matrigel o laminina
• Condiciones ambientales: Mantener una temperatura precisa (37°C), niveles de CO2 (5%) y humedad es esencial. Las variaciones pueden afectar negativamente la salud y la diferenciación celular
• Pasaje: Las células madre generalmente necesitan ser pasadas (sub-cultivadas) regularmente para prevenir la sobreconfluencia, lo cual puede llevar a la diferenciación o la muerte celular. Este proceso requiere una manipulación cuidadosa para evitar dañar las células
• Mantenimiento de la pluripotencia: Para las células madre pluripotentes (como las ESCs y las iPSCs), es crítico mantener su estado indiferenciado, lo cual requiere la adición de factores específicos y una monitorización regular
• Control de la diferenciación: Si la diferenciación es el objetivo, es necesario un control preciso sobre el proceso de inducción y el tiempo para lograr los tipos de células deseados

A pesar de estos desafíos, con la capacitación adecuada, la adherencia a los protocolos y la atención a los detalles, el cultivo de células madre puede ser manejado con éxito.