Medios de cultivo para células madre

El tipo de medio utilizado en el cultivo de células madre depende del tipo específico de células madre que se estén cultivando. Aquí hay algunos tipos de medios comunes:

Células madre embrionarias (ESCs):

• mTeSR1 o mTeSR Plus: Medio definido, sin suero para células madre embrionarias humanas
• KnockOut™ DMEM/F-12: A menudo suplementado con KnockOut™ Serum Replacement, FGF básico (bFGF) y otros aditivos

Células madre pluripotentes inducidas (iPSCs):

• Essential 8™ Medium: Medio químicamente definido, libre de xenogénicos
• TeSR-E8: Otro medio definido, libre de xenogénicos para iPSCs humanas

Células madre mesenquimales (MSCs):

• DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle Medium): A menudo suplementado con 10-20% de suero fetal bovino (FBS), L-glutamina y antibióticos
• α-MEM (Alpha Minimum Essential Medium): También suplementado de manera similar a DMEM

Células madre neurales (NSCs):

• Neurobasal™ Medium: Suplementado con B-27, suplementos N-2, EGF y bFGF
• DMEM/F-12: Suplementado con N-2, B-27 y factores de crecimiento

Células madre hematopoyéticas (HSCs):

• StemSpan™ SFEM: Medio de expansión sin suero, a menudo suplementado con citocinas y factores de crecimiento específicos

Células madre cardíacas:

• RPMI 1640: A menudo suplementado con B-27 y otros factores específicos

Estos tipos de medios suelen ser suplementados con factores de crecimiento específicos, citocinas y otros aditivos dependiendo de los requisitos exactos de las células madre que se estén cultivando.

El cultivo de células madre puede ser desafiante debido a sus requisitos específicos y su sensibilidad a las condiciones ambientales. Aquí hay algunos factores que contribuyen a la dificultad:

• Esterilidad: Mantener un ambiente estéril es crucial para prevenir la contaminación, lo cual puede ser más desafiante debido a la manipulación frecuente y los cambios de medio necesarios
• Requisitos nutricionales: Las células madre a menudo requieren nutrientes específicos, factores de crecimiento y suplementos adaptados a su tipo (por ejemplo, bFGF para células madre pluripotentes)
• Recubrimiento de superficie: La adhesión y el crecimiento adecuados a menudo requieren el recubrimiento de las superficies de cultivo con proteínas de la matriz extracelular como Matrigel o laminina
• Condiciones ambientales: Mantener una temperatura precisa (37°C), niveles de CO2 (5%) y humedad es esencial. Las variaciones pueden afectar negativamente la salud y la diferenciación celular
• Pasaje: Las células madre generalmente necesitan ser pasadas (sub-cultivadas) regularmente para prevenir la sobreconfluencia, lo cual puede llevar a la diferenciación o la muerte celular. Este proceso requiere una manipulación cuidadosa para evitar dañar las células
• Mantenimiento de la pluripotencia: Para las células madre pluripotentes (como las ESCs y las iPSCs), es crítico mantener su estado indiferenciado, lo cual requiere la adición de factores específicos y una monitorización regular
• Control de la diferenciación: Si la diferenciación es el objetivo, es necesario un control preciso sobre el proceso de inducción y el tiempo para lograr los tipos de células deseados

A pesar de estos desafíos, con la capacitación adecuada, la adherencia a los protocolos y la atención a los detalles, el cultivo de células madre puede ser manejado con éxito.