Thermo Scientific™ TMTsixplex™ Isobaric Mass Tagging Kit

Los reactivos Tandem Mass Tag™ 6-plex (TMTsixplex™) son conjuntos de compuestos isobáricos (es decir, la misma masa y estructura, también llamados isómeros isotópicos) que están activados por NHS para el etiquetado covalente e irreversible de grupos de aminas primarias (–NH2). Cada reactivo isobárico contiene un número diferente de isótopos pesados en la región indicadora de masas, lo que resulta en una masa indicadora única durante el tándem de MS/MS para la identificación de muestras y la cuantificación relativa. Los kits y reactivos de marcaje isobárico de masas Thermo Scientific TMT reactivos a la amina permiten la cuantificación multiplex de las proteínas extraídas de células y tejidos de hasta 6 muestras mediante espectrometría de masas en tándem.

Características de los kits y reactivos de etiquetas TMTsixplex:
• Potente: el análisis de MS multiplexado de varias muestras aumenta el rendimiento de las muestras y permite la cuantificación relativa de hasta seis muestras diferentes derivadas de células, tejidos o fluidos biológicos
• Robusto: la química consistente permite una transición eficiente desde el desarrollo de métodos a la cuantificación multiplex, lo que facilita la investigación de descubrimiento de biomarcadores
• Eficaz: los reactivos aminorreactivos de éster NHS activado garantizan un etiquetado superior al 95 % de todos los péptidos independientemente de la secuencia de proteínas o la especificidad de la enzima proteolítica
• Compatible: el sistema está optimizado para su uso con plataformas de Thermo Scientific Orbitrap MS/MS de alta resolución con análisis de datos totalmente compatibles con Proteome Discoverer™ 2.3 y superior

Aplicaciones de los kits y reactivos de etiquetas TMTsixplex:
• Identificación y cuantificación de proteínas a partir de múltiples muestras de células, fluidos tisulares o biológicos
• Perfil de expresión de proteínas de estados normal frente a estado con enfermedad o de control frente a tratado
• Análisis cuantitativo de proteínas para las que no hay anticuerpos disponibles
• Identificación y cuantificación de proteínas de membranas modificadas después de la traslación
• Identificación y cuantificación de cientos a miles de proteínas en un solo experimento

Dado que los reactivos TMT comparten una estructura y masa idénticas (es decir, son isómeros isotópicos), los péptidos etiquetados se coeluyen durante la separación de LC y se coaíslan durante el análisis de MS/MS, lo que resulta en menos identificaciones de péptidos faltantes entre las muestras. Durante el análisis de MS/MS, cada etiqueta isobárica también se fragmenta para producir una masa iónica de informador única que se utiliza para la identificación y cuantificación de muestras. La cuantificación de proteínas se logra comparando las intensidades relativas de los seis iones indicadores.

Los reactivos TMT se suministran en formato autónomo o bien en kits optimizados con todos los reactivos y controles necesarios para garantizar los máximos niveles de flexibilidad, comodidad y fiabilidad. Los reactivos Tandem Mass Tag combinados con instrumentos Thermo Scientific Orbitrap de alta resolución y el software Proteome Discoverer proporcionan soluciones integradas de sistemas totales para el análisis cuantitativo de la expresión de proteínas. Para el análisis de alta resolución de péptidos marcados con TMT, la columna LC recomendada para la fuente Nanospray Flex es la columna LC Acclaim PepMap 100 C18 (n.º de cat. cat. 164942 o 164939). Para la fuente EASY-Spray, la columna LC recomendada es la columna LC EASY-Spray C18 (n.º ES902 o ES903).