Invitrogen™ T-REx™ Core Kit, with pcDNA™4/TO Vector

• Utiliza el promotor de CMV completo y añade elementos de control al operón de resistencia bacteriana a la tetraciclina para reprimir eficazmente y volver a reprimir la transcripción de una de las secuencias promotoras de mamíferos más fuertes que se conocen
• Activación específica: utiliza un mecanismo represor que bloquea la transcripción del potente promotor de CMV en ausencia de la tetraciclina
• Debido a que los elementos no utilizan transactivadores virales, puede lograr una expresión de alto nivel a partir de un promotor de CMV completo sin la activación secundaria y no específica de los genes anfitriones
• Los elementos de control transcripcional T-REx se suministran a través de dos secuencias de operador de tetraciclina (TetO₂) insertadas entre la caja TATA del promotor de CMV y el sitio de inicio transcripcional
• La secuencia de TetO₂ en sí no tiene efecto en la expresión
• Cuando la proteína represora de tetraciclina (TR) está presente, se une eficazmente a los sitios de TetO₂ y bloquea el inicio de la transcripción
• La tetraciclina añadida al medio de cultivo se une a la proteína TR y cambia su conformación; este cambio hace que la proteína TR libere los sitios de TetO₂, lo que reduce la transcripción del promotor de CMV; el resultado es una expresión de alto nivel del gen de interés

• Los niveles de expresión se pueden modular en función de la concentración de tetraciclina y pueden inducirse a niveles que se logran con vectores de expresión CMV constitutiva
• T-REx es un potente sistema de expresión de mamíferos inducible que permite regular la expresión de un potenciador-promotor del citomegalovirus (CMV) humano completo
• Secuencia completa del potenciador-promotor de CMV que contiene dos copias de la secuencia de operador de tetraciclina TetO₂ para una expresión regulada de alto nivel
• Zeocin o gen de resistencia a la higromicina para la selección eficaz de líneas de células de mamíferos estables
• Sitio de clonación múltiple de gran tamaño para simplificar la clonación
• Además, pcDNA™4/TO/myc-His ofrece un epítopo c-myc para una detección rápida de proteínas recombinantes con un anticuerpo anti-myc y una secuencia de polihistidina (6xHis) para una purificación sencilla de la proteína recombinante con resina quelante de níquel y una detección con el anticuerpo anti-His (C-terminal)
• Vector regulador, pcDNA™6/TR, proporcionado para la expresión de alto nivel de la proteína represora de tetraciclina (TR).
• El vector expresa el gen de resistencia a la blasticidina para una selección rápida de líneas celulares de mamíferos que expresan la proteína TR de forma estable

Expresión de mamíferos, expresión de proteínas, proteínas, expresión, aislamiento y análisis, expresión regulada