Columnas de desalado

Columnas de desalado

Columnas de cromatografía de filtración en gel desechables o reutilizables que se emplean en biología de proteínas o extracción y purificación de ADN para la purificación fraccionaria de proteínas, ácidos nucleicos y otras macromoléculas a partir de reactivos y sales de tampón de bajo peso molecular.

Las columnas de desalado son tipos especiales de columnas de cromatografía de filtración de gel (exclusión) adecuadas para la purificación fraccional de proteínas, ácidos nucleicos y otras macromoléculas. Su uso ofrece una alternativa más cómoda y rápida a la diálisis.

Las columnas de desalado pueden ser columnas de plástico o vidrio desechables o reutilizables preenvasadas con cordones de un medio adecuado, normalmente polisacárido (Sephadex) o poliacrilamida porosa más resistente a la degradación enzimática. Los cordones han definido puntos de exclusión de corte de peso molecular (MWCO), de alrededor de 6000 Da en general, que atrapan, retienen y ralentizan la elución de moléculas pequeñas por debajo de MWCO, pero que excluyen y, por lo tanto, no impiden la elución más rápida de macromoléculas más grandes como proteínas.

Las columnas de desalado pueden alcanzar altos rendimientos de recuperación de muestras superiores al 95 %, con capacidades de columna que oscilan entre 5 μl y 10 ml, adecuadas para volúmenes de muestras aplicados en cualquier lugar entre 2 μl y 4 ml.

Tipos de columnas de desalado
• Columnas diseñadas para flujo por gravedad sencillo
• Columnas de centrifugación diseñadas especialmente para centrifugación
• Columnas compatibles con la presión diseñadas para su uso con bombas adecuadas o con sistemas LC preparativos integrados

¿Para qué se utilizan las columnas de desalado?
• Eliminación de sales de muestras de proteínas
• Intercambio de tampones antes de la electroforesis posterior o cromatografía de afinidad
• Eliminación de etiquetas radioactivas no reaccionadas
• Eliminación de fenol o nucleótidos libres de preparados de ácidos nucleicos
• Eliminación de cebadores o colorantes de reacciones de PCR o secuenciación
• Eliminación de otros compuestos de bajo peso molecular, como enlaces cruzados, reactivos de etiquetado o derivatización, cofactores, inhibidores u otros contaminantes

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