Invitrogen™ Kit de ELISA intracelular multiespecie AKT, colorimétrico

Descripción

El kit de detección colorimétrica de ELISA intracelular multiespecie AKT proporciona un método sencillo para cuantificar las proteínas intracelulares en células enteras. Principio del método para realizar el ensayo, las células son primero chapadas, tratadas y fijadas. La expresión de las proteínas de interés se monitoriza en pocillos de una microplaca utilizando anticuerpos primarios específicos (consulte la sección Información importante del producto para consultar los anticuerpos incluidos en cada kit) y un reactivo de detección conjugado con peroxidasa de rábano picante (HRP). El kit se suministra con una tinción de células completas para controlar las diferencias en placa de las células, lo cual es importante al medir los niveles relativos de una proteína con diferentes tratamientos o evaluar su forma de modificación postranslacional (PTM). Después de la tinción, los resultados se analizan normalizando los valores de absorbancia (actividad de HRP) al número de células, que se ajusta a las diferencias de placas celulares entre los pocillos. Validación rigurosa Cada lote fabricado de este kit ELISA se somete a pruebas de calidad para determinar criterios tales como sensibilidad, especificidad, precisión y consistencia entre lotes. Consulte el manual para obtener más información sobre la validación.

AKT (proteína quinasa B, PKB, RAS-alfa) es 57una serina kDa/treonina cinasa que desempeña un papel importante en distintas respuestas biológicas, como la regulación del metabolismo, la supervivencia celular y el crecimiento por fosforilación de múltiples proteínas. AKT se activa por medio de insulina, PI3K, IGF1 y otros factores de crecimiento y supervivencia. AKT favorece la supervivencia celular mediante la inhibición de la apoptosis a través de la fosforilación y la inactivación de varios objetivos, como los factores de transcripción Forkhead y caspasa-9. Existen tres isoformas mamíferas de Akt: AKT1 (PKB alfa), AKT2 (PKB beta) y AKT3 (PKB gamma) con AKT2 y AKT3 siendo aproximadamente un 82 % idéntico a la isoforma AKT1. Cada isoforma tiene un dominio de homología de pleckstrina (PH), un dominio de cinasa y un dominio regulador terminal carboxi. AKT fue originalmente clonado a partir del retrovirus AKT8 y es un regulador clave de muchas vías de transducción de señales. La vía de AKT es un objetivo importante para las terapias oncológicas donde la disfunción de señalización de AKT ha participado en muchos tipos de cáncer, como por ejemplo, los síndromes de cáncer conocidos como la facomatosis.