OPTIZYME™ XbaI, Fisher BioReagents™

Descripción

5'...T^C T A G A...3'
3'...A G A T C^T...5'

Suministrado con: 10 tampones X OPTIZYME 4
Condiciones para actividad al 100 %

• 1 tampón OPTIZYME 4: 33 mM de Tris-acetato (pH 7,9 a 37 °C), 10 mM de acetato de magnesio, 66 mM de acetato de potasio y 0,1 mg/ml de BSA
• Incube a 37°C

Actividad enzimática en los tampones OPTIZYME:

• Tampón 1: 50 - 100 %
• Tampón 2: 50 - 100 %
• Tampón 3: 20 - 50 %
• Tampón 4: 100 %
• Tampón 5: 0 - 20 %

Tampón de almacenamiento:
10 mM de Tris-HCl (pH 7.4 a 25 °C), 100 mM de KCl, , 7mM 2-mercaptoetanol, 1 mM de EDTA, 0,2 mg/ml de BSA y 50 % (p/v) de glicerol.
Ligadura y escisión:
más del 95 % de los fragmentos de ADN pueden ligarse y recortarse después de una sobredigestión de 50 veces la cantidad de XbaI.
Digestión del ADN integrado en agarosa:
se requiere un mínimo de 5 unidades de XbaI para completar la digestión de 1 μg de ADN lambda integrado en agarosa en 16 horas.
Notas:

• XbaI se bloquea por solapación con metilación dam.
• Para evitar la metilación dam, use una cepa de dam-, dcm-.

Extremos compatibles: BcuI, Eco130I, NheI, XmaJI
Efectos de la metilación:
Dam: Puede solaparse; bloqueado

• 5'...TCTAGm6A TC...3'
• 3'...AGATC Tm6AG...5'
• (La escisión está bloqueada)

Dcm: nunca se solapa; sin efecto
CpG nunca se solapa; sin efecto
EcoKI: nunca se solapa; sin efecto
EcoBI: nunca se solapa; ningún efecto.