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OPTIZYME™ XbaI, Fisher BioReagents™
Marca: Fisher Bioreagents BP8008-5
Detalles adicionales : Peso : 0.01000kg
Descripción
5'...T^C T A G A...3'
3'...A G A T C^T...5'
Suministrado con: 10 tampones X OPTIZYME 4
Condiciones para actividad al 100 %
- 1 tampón OPTIZYME 4: 33 mM de Tris-acetato (pH 7,9 a 37 °C), 10 mM de acetato de magnesio, 66 mM de acetato de potasio y 0,1 mg/ml de BSA
- Incube a 37°C
- Tampón 1: 50 - 100 %
- Tampón 2: 50 - 100 %
- Tampón 3: 20 - 50 %
- Tampón 4: 100 %
- Tampón 5: 0 - 20 %
10 mM de Tris-HCl (pH 7.4 a 25 °C), 100 mM de KCl, , 7mM 2-mercaptoetanol, 1 mM de EDTA, 0,2 mg/ml de BSA y 50 % (p/v) de glicerol.
Ligadura y escisión:
más del 95 % de los fragmentos de ADN pueden ligarse y recortarse después de una sobredigestión de 50 veces la cantidad de XbaI.
Digestión del ADN integrado en agarosa:
se requiere un mínimo de 5 unidades de XbaI para completar la digestión de 1 μg de ADN lambda integrado en agarosa en 16 horas.
Notas:
- XbaI se bloquea por solapación con metilación dam.
- Para evitar la metilación dam, use una cepa de dam-, dcm-.
Efectos de la metilación:
Dam: Puede solaparse; bloqueado
- 5'...TCTAGm6A TC...3'
- 3'...AGATC Tm6AG...5'
- (La escisión está bloqueada)
CpG nunca se solapa; sin efecto
EcoKI: nunca se solapa; sin efecto
EcoBI: nunca se solapa; ningún efecto.
Especificaciones
50 U/μl | |
37 °C | |
Indica la eficacia del ligamiento de los fragmentos de ADN generados por la digestión con La enzima de restricción. | |
10000 U | |
XbaI |
Tampón 4 OPTIZYME™ 10X | |
7,4 | |
10 mM de Tris HCl (pH 7,4), 100 mM de KCl, 7 mM de 2-mercaptoetanol, 1 mM de EDTA, 0,2 mg/ml de BSA, glicerol al 50 % | |
T.CTAGA | |
Líquido |