Invitrogen™ DAF-FM Diacetate (4-Amino-5-Methylamino-2',7'-Difluorofluorescein Diacetate)

Descripción

Es esencialmente no fluorescente hasta que reacciona con el NO, tras lo cual forma un benzotriazol fluorescente. La fluorescencia de DAF-FM se puede ser percibir mediante cualquier instrumento capaz de detectar fluoresceína, como citómetros de flujo, microscopios, lectores de microplacas de fluorescencia y fluorímetros.

• Ex/Em de DAF-FM: aprox. 495/515 nm
• El producto liofilizado debe disolverse con DMSO y añadirse a un tampón acuoso para crear una solución de trabajo
• El diacetato de DAF-FM penetra en las células y se expande pasivamente en las membranas celulares; una vez dentro de la célula, se convierte en un producto impermeabilizante celular
• Los tampones que contienen seroalbúmina bovina (BSA) y rojo de fenol pueden afectar a la fluorescencia y deben utilizarse con precaución.
• El valor cuántico de fluorescencia de DAF-FM es de aprox. 0,005, pero aumenta aproximadamente 160 veces, hasta ∼ 0,81, después de reaccionar con NO
• Evaluación mediante citometría de flujo de la producción de NO en linfoblastos deficientes en transaldolasa
• Detección de la acumulación de NO en neuronas corticales embrionarias tras la estimulación de las neurotrofinas
• Adquisición de imágenes in vivo de NO en el pez cebra

• Detección microscópica intravital de generación de NO asociada con la angiogénesis en ratones
• Cuantificación de la liberación de NO inducida por ATP en las plaquetas de conejos
• Los espectros del aducto de NO de DAF-FM son independientes del pH a partir de un pH superior a 5,5
• El aducto de NO de DAF-FM es considerablemente más fotoestable que el de DAF-2, lo que se traduce en mayor tiempo para la captura de imágenes
• El DAF-FM es un reactivo más sensible a NO que DAF-2 (el límite de detección de NO con DAF-FM es de aproximadamente 3 nM, mientras que con DAF-2 es de aproximadamente 5 nM)

Consulte el Manual de Molecular Probes™ para obtener información adicional sobre el producto.

Análisis celular, metabolismo celular, viabilidad, proliferación y función celulares, investigación de óxido nítrico, estrés nitrooxidativo