Invitrogen™ Kit de ensayo de coactivadores de LXR alfa TR-FRET LanthaScreen™, conejo

Descripción

Este kit contiene anticuerpos Tb-anti-GST de conejo; otros componentes del kit son iguales a los del kit PV4655:

El ensayo de coactivadores de LXR (receptor X hepático) alfa TR-FRET LanthaScreen™ proporciona un método sensible y robusto para la detección de alto rendimiento de los posibles ligandos de LXR alfa como agonistas del reclutamiento de coactivadores. El kit utiliza un anticuerpo anti-GST etiquetado con terbio (Tb), un péptido coactivador etiquetado con fluoresceína y un dominio de unión al ligando LXR alfa (LBD) que está marcado con glutatión-S-transferasa (GST), en un formato de ensayo homogéneo de mezcla y lectura.

En el ensayo de coactivadores de LXR alfa TR-FRET LanthaScreen™, se añade LXR alfa-LBD a los compuestos problema de ligandos seguido de la adición de una mezcla del péptido coactivador de fluoresceína y anticuerpo anti-GST etiquetado con Tb. Después de un periodo de incubación a temperatura ambiente, se calcula la relación TR-FRET de 520 nm/495 nm y se puede utilizar para determinar la EC₅₀ a partir de una curva de dosis-respuesta del compuesto. Basado en la biología de la interacción del péptido coactivador de LXR alfa, la EC₅₀ de este ligando es un valor compuesto que representa la cantidad de ligando necesaria para unirse al receptor, efectuar un cambio conformacional y reclutar el péptido coactivador (figura 1).

Contenido y almacenamiento:
El kit de ensayo de coactivadores de LXR alfa TR-FRET LanthaScreen™ contiene proteína LXR alfa-LBD (GST), péptido coactivador TRAP220/DRIP-2 etiquetado con fluorescencia, anticuerpo anti-GST etiquetado con Tb y tampones. Almacene los componentes como se indica en el protocolo del ensayo (- 80 °C, - 20 °C o + 4 °C).