Thermo Scientific™ MboI (10 U/μl)

Descripción

ADN lambda (dam-) digerido con MboI, agarosa al 1,4 %, 116 sitios de escisión

Las endonucleasas de restricción convencionales representan una gran colección de enzimas de restricción de alta calidad, optimizadas para funcionar en uno de los tampones del sistema de cinco tampones. Además, se proporciona el tampón universal Tango para mayor comodidad en digestiones dobles. Todas las enzimas muestran una actividad del 100 % en las condiciones de reacción y tampón recomendadas. Para garantizar uniformidad en el rendimiento, los tampones de enzimas de restricción Thermo Scientific contienen BSA previamente mezclada, lo que mejora la estabilidad de numerosas enzimas y fija sustancias contaminantes que pueden estar presentes en preparaciones de ADN.

5'...▵G A T C ...3'

3'.. C T A G▵...5'

Condiciones para una actividad del 100 %:

• 1 tampón R: 10 mm de Tris-HCl (pH 8,5 a 37 °C), 10 mm de MgCl₂, 100 mm de KCl y 0,1 mg/ml de BSA
• Incubar a 37 °C.

Tampón de almacenamiento:

• Mbol se suministra en: 10 mm de Tris-HCl (pH 7,5 a 25 °C), 50 mm de KCl, 1 mm de DTT, 0,1 mm de EDTA, 0,2 mg/ml de BSA y 50 % (v/v) de glicerol

Ligadura y refragmentación:

• Tras una sobredigestión con una cantidad 50 veces mayor a la recomendada de MboI, más del 95 % de los fragmentos de ADN pueden ligarse y recortarse

Efectos de metilación:

• Dam: se solapa completamente, bloqueada.
• Dcm: nunca se solapa, sin efecto.
• CpG: puede solaparse, sin efecto.
• EcoKI: nunca se solapa, sin efecto.
• EcoBI: puede solaparse, bloqueada.

Nota:

Analizado mediante ADN de lambda (dam) (SD0021). Mbol se bloquea por solpaación con metilación dam. Para evitar metilación dam, utilice una cepa dam, dcm-, como GM2163 (M0099). MboI, Bsp143I y DpnI reconocen la misma secuencia pero tienen diferentes sensibilidades de metilación y sitios de escisión.