Thermo Scientific™ Eco47III (Afel) (10 U/μl)

Descripción

ADN lambda digerido con Eco47III (AfeI), agarosa al 0,7 %, 2 sitios de escisión

Las endonucleasas de restricción convencionales representan una gran colección de enzimas de restricción de alta calidad, optimizadas para funcionar en uno de los tampones del sistema de cinco tampones. Además, se proporciona el tampón universal Tango para mayor comodidad en digestiones dobles. Todas las enzimas muestran una actividad del 100 % en las condiciones de reacción y tampón recomendadas. Para garantizar uniformidad en el rendimiento, los tampones de enzimas de restricción Thermo Scientific contienen BSA previamente mezclada, lo que mejora la estabilidad de numerosas enzimas y fija sustancias contaminantes que pueden estar presentes en preparaciones de ADN.

5'...A G C▵G C T...3'

3'...T C G▵C G A...5'

Condiciones para una actividad del 100 %:

• 1 tampón O: 50 mm de Tris-HCl (pH 7,5 a 37 °C), 10 mm de MgCl₂, 100 mm de NaCl y 0,1 mg/ml de BSA
• Incubar a 37 °C.

Tampón de almacenamiento:

• Eco47III se suministra en: 10 mm de Tris-HCl (pH 7,4 a 25 °C), 100 mm de KCl, 1 mm de DTT, 1 mm de EDTA, 0,2 mg/ml de BSA y 50 % (v/v) de glicerol

Ligadura y refragmentación:

• Tras una sobredigestión con 50 veces la cantidad recomendada de Eco47III, más del 80 % de los fragmentos de ADN de pBR322 pueden ligarse y más del 90 % de ellos pueden recortarse

Efectos de metilación:

• Dam: nunca se solapa, sin efecto.
• Dcm: nunca se solapa, sin efecto.
• CpG: se solapa completamente, bloqueada.
• EcoKI: nunca se solapa, sin efecto.
• EcoBI: puede solaparse, efecto sin determinar.

Digestión del ADN integrado en agarosa:

• Se requieren como mínimo 5 u de la enzima para la digestión completa de 1 μg de ADN lambda integrado en agarosa en 16 horas