Kits Thermo Scientific SMART Digest y SMART Digest ImmunoAffinity (IA)
Los kits Thermo Scientific™ SMART Digest™ y SMART Digest Immunoaffinity (IA) se han diseñado para conseguir una digestión de proteínas, en cuantificación y caracterización bioterapéutica, fácil de usar, rápida y altamente reproducible.
Los kits SMART Digest incluyen todo lo que necesita para realizar digestión de proteínas en una sola caja. La tecnología está basada en una enzima termoestable (tripsina, quimotripsina o proteinasa K) que se inmoviliza en una partícula (ya sea magnética o no magnética). Este diseño ayuda a revolucionar el proceso de digestión de proteínas.
Uso fácil: solo unos pocos pasos sencillos
El proceso implica añadir el tampón preparado previamente, que se suministra con el kit, a las partículas de tripsina inmovilizada (se suministran preempaquetadas en tubos de PCR o a granel para adaptase a sus necesidades de formato) y, a continuación, añadir su muestra antes de calentar y agitar durante un tiempo predeterminado. Después, la muestra se limpia antes del análisis.
Rápido: las proteínas pueden ser digeridas en pocos minutos en lugar de tener que esperar una noche
Cada tubo de PCR contiene 14 µg de enzima inmovilizada que puede digerir de 200 pg a 3,5 mg de proteína total.
Esto no solo ayuda a eliminar el paso de cuantificación de proteínas, sino que acelera rápidamente el proceso de digestión.
Alta reproducibilidad: los kits SMART Digest ofrecen una alta reproducibilidad entre diferentes usuarios
La eliminación del gran número de productos químicos necesarios y de los laboriosos pasos requeridos para realizar una digestión en solución implica que los kits SMART Digest son capaces de proporcionar unos resultados altamente reproducibles. A continuación, se muestran 3 cromatogramas superpuestos del mismo anticuerpo monoclonal digerido de 3 usuarios distintos en 3 días distintos con un RSD <5 %.
Los kits SMART Digest ImmunoAffinity (IA)
Los kits SMART Digest ImmunoAffinity (IA) ofrecen todas las ventajas de los kits SMART Digest pero con la ventaja añadida de combinar el proceso de digestión e inmunocaptura en un solo pocillo.
Esto tiene ventajas significativaspara los estudios de cuantificación, donde se suele emplear la captura por inmunoafinidad para aumentar la sensibilidad mediante la purificación de proteínas de bajo nivel de matrices biológicas complejas. Este paso suele ir seguido de la digestión.
Los kits SMART Digest IA ayudan a establecer un proceso:
- Fácil y sencillo
- Rápido: unas pocas horas en lugar de toda la noche
- Muy reproducible y sensible
¿Que incluyen los kits SMART Digest y los kits SMART Digest IA?
Estos kits están diseñados en una variedad de formatos para adaptarse a sus necesidades:
- 3 opciones de enzima diferentes (tripsina, quimotripsina, proteinasa K)
- Partículas preempaquetadas en tubos de PCR
- Varias opciones de partículas a granel que pueden adaptarse a distintos formatos de pocillo o placa
- Opción de partículas magnéticas o no magnéticas para adaptarse a los dispositivos de automatización, como por ejemplo las plataformas Thermo Fisher Scientific™ KingFisher™
- Opción con filtración o microelución SPE para la limpieza tras la digestión de muestras de matrices complejas