La aislamiento de ARN implica una variedad de productos químicos para lisar las células, inhibir las ARNasas y separar el ARN de otros componentes celulares. Algunos productos químicos clave comúnmente utilizados en la aislamiento de ARN son:
- Tiocianato de guanidinio: Un agente caotrópico que desnaturaliza proteínas y protege el ARN de la degradación por ARNasa. Se encuentra en reactivos como TRIzol
- Fenol: Utilizado en la extracción con fenol-cloroformo para desnaturalizar proteínas y separarlas del ARN
- Cloroformo: Mezclado con fenol para crear un sistema bifásico que separa el ARN en la fase acuosa
- Isopropanol o etanol: Utilizado para precipitar el ARN de la fase acuosa después de la extracción
- Acetato de sodio: A menudo añadido a la fase acuosa para ayudar a precipitar el ARN durante la precipitación con alcohol
- DNasa I: Una enzima utilizada para digerir el ADN contaminante en las preparaciones de ARN
- Reactivo TRIzol: Una solución comercial que contiene tiocianato de guanidinio, fenol y otros componentes para la extracción de ARN
- Buffers de membrana de sílice: Buffers que contienen sales caotrópicas (como cloruro de guanidinio) y etanol utilizados en la purificación de ARN basada en columnas de sílice
- Cloruro de litio: Utilizado para la precipitación selectiva de ARN, particularmente ARN de alto peso molecular
- Perlas magnéticas: Recubiertas con oligo(dT) u otras moléculas para unir ARN, utilizadas en métodos de purificación basados en perlas
Estos productos químicos son esenciales para aislar y purificar eficazmente el ARN mientras se previene la degradación y la contaminación.