Extracción y purificación de ADN

El propósito de la extracción y purificación de ADN es aislar ADN de células o tejidos para que pueda ser utilizado en diversas aplicaciones posteriores. Estas aplicaciones incluyen:

• Investigación genética: Estudiar la estructura, función y regulación de los genes
• Diagnósticos: Identificar trastornos genéticos, enfermedades infecciosas y otras condiciones de salud
• Análisis forense: Analizar ADN de escenas de crimen con fines de identificación
• Biotecnología: Ingeniería genética, clonación y producción de organismos genéticamente modificados (OGM)
• Desarrollo farmacéutico: Descubrimiento y desarrollo de nuevos medicamentos y terapias
• Ciencia agrícola: Reproducción de plantas y animales con características deseables

La extracción y purificación de ADN aseguran que el ADN obtenido esté libre de contaminantes como proteínas, lípidos y otros componentes celulares que podrían interferir con estas aplicaciones.

Para purificar el ADN después de la extracción, se utilizan métodos comunes como:

1. Extracción con fenol-cloroformo: Elimina las proteínas utilizando fenol y cloroformo, seguido de una precipitación con etanol.
2. Precipitación con etanol: El ADN se precipita con etanol y acetato de sodio, luego se lava con etanol al 70%.
3. Métodos basados en columnas de sílice: El ADN se une a las columnas de sílice, los contaminantes se eliminan y el ADN se eluye.
4. Métodos basados en perlas magnéticas: El ADN se une a las perlas magnéticas, los contaminantes se eliminan y el ADN se eluye.
5. Centrifugación en gradiente de densidad de cloruro de cesio: Utiliza ultracentrifugación para separar el ADN basado en la densidad.

Cada método se elige en función de los requisitos de pureza y los recursos disponibles.

El filtrado es importante en la extracción de ADN por varias razones:

• Eliminación de residuos: Ayuda a eliminar materia particulada, como fragmentos celulares y materiales no disueltos, que podrían interferir con los pasos posteriores en el proceso de extracción
• Mejora de la pureza: Al eliminar los contaminantes, el filtrado asegura que el ADN extraído sea más limpio y más adecuado para aplicaciones posteriores como PCR, secuenciación y clonación
• Prevención de daños en el equipo: El filtrado protege el equipo de laboratorio (por ejemplo, centrifugadoras, pipetas) de obstrucciones y posibles daños causados por residuos
• Mejora de la precisión: Muestras más limpias conducen a resultados más precisos y fiables en el análisis genético y otras aplicaciones

En general, el filtrado es un paso crucial para asegurar la calidad e integridad del ADN extraído.