Molecular Probes™ Vybrant™ FLICA Caspase Apoptosis Assay Kits for flow cytometry

Descripción

Quickly detect caspase-mediated apoptosis by flow cytometry with Vybrant FAM caspase assay kits for poly-caspases and caspases 3 and 7. The Vybrant FAM caspase assay kits use fluorescent inhibitor of caspases (FLICA) methodology to detect and report caspase activity. Specifically, these caspase assay kits contain engineered FLICA substrates FAM-VAD-FMK (for poly-caspases), FAM-DEVD-FMK (for caspase-3/7), and FAM-LETD-FMK (for caspase-8). They also include Hoechst 33342 and propidium iodide stains, enabling simultaneous evaluation of membrane permeability and cell cycle by flow cytometry.

El kit de ensayo de policaspasas Vybrant™ FAM emplea un enfoque novedoso para detectar las caspasas activas que se basa en una metodología de inhibidor fluorescente de caspasas (FLICA™), es decir, una etiqueta de afinidad. El reactivo asocia una fragmentación de la cetona de fluorometilo (FMK) que puede reaccionar de forma covalente con una cisteína, con una secuencia de ácido amino específica de la caspasa. Para las policaspasas, esta secuencia de reconocimiento es el ácido valina-alanina-aspártico (VAD). Un grupo de fluoresceína está adjunto como indicador. Se considera que el reactivo FLICA interactúa con el centro de reacción enzimática de una caspasa activada a través de la secuencia de reconocimiento, y luego se acopla covalentemente a través de la fragmentación de la FMK. El inhibidor del FLICA es permeable en células y no citotóxico. Las moléculas FLICA no enlazadas se disipan fuera de la célula y se lavan; la señal verde fluorescente restante es una medida directa de la cantidad de caspasa activa que estaba presente en el momento en que se agregó el inhibidor. Este kit incluye el reactivo FLICA FAM-VAD-FMK, la tinción Hoechst 33342 y la tinción de yoduro propidio, que permite la evaluación simultánea de la activación de la caspasa, la permeabilidad de la membrana y el ciclo celular mediante citometría de flujo.

Consulte una guía de selección para todos los ensayos de apoptosis para citometría de flujo.