Invitrogen™ pHrodo™ Antibody Labeling Kits

Los kits de etiquetado de proteínas a microescala pHrodo iFL Red y pHrodo iFL Green proporcionan los reactivos necesarios para etiquetar fácilmente tres muestras de proteínas o anticuerpos purificados en microescala (de 20 a 100 µg) con colorante pHrodo iFL Red o pHrodo iFL Green. Estos kits contienen colorante de éster pHrodo iFL Red o Green STP y reactivo a la amina, que se une covalentemente a lisinas libres donde se presenten en un anticuerpo o proteína.

Los colorantes pHrodo iFL Red y pHrodo iFL Green son versiones mejoradas de los colorantes pHrodo Red y pHrodo Green, optimizados para la creación de bioconjugados brillantes y solubles que se utilizarán en el estudio de internalización de anticuerpos, endocitosis y fagocitosis. También son más solubles que los colorantes pHrodo Red y pHrodo Green originales, lo que los hace útiles para el etiquetado de anticuerpos que de otra manera podrían precipitar fuera de la solución durante la conjugación. Los colorantes pHrodo iFL Red y pHrodo iFL Green no son fluorescentes fuera de la célula, pero presentan fluorescencia rojo brillante o verde brillante a medida que el pH de su entorno se vuelve más ácido, como el que se encuentra dentro de fagosomas y endosomas.

Los kits de etiquetado de microescala pHrodo iFL Red y Green ofrecen las siguientes ventajas:
• Comodidad: el etiquetado suele tardar dos horas, con menos de 30 minutos de manipulación
• Versatilidad: el etiquetado se puede realizar en proteínas con pesos moleculares entre 12 y 150 kDa
• Personalizable: cree sus propias sondas para estudiar la internalización de anticuerpos, fagocitosis y endocitosis

El kit de etiquetado de células de mamíferos y bacterias pHrodo Deep Red proporciona los reactivos necesarios para etiquetar fácilmente células vivas (mamíferos o bacterias) para el estudio de fagocitosis y endocitosis. Está optimizado para la discriminación de células fagocitadas y no fagocitadas, ya que el colorante pHrodo Deep Red sensible al pH y de fondo bajo no muestra señal en condiciones neutras y presenta fluorescencia solo cuando se expone a entornos ácidos. Esta exclusiva propiedad de pHrodo Deep Red permite el desarrollo rápido de ensayos y la certeza de los resultados al investigar las vías endocíticas y fagocíticas. El colorante pHrodo Deep Red permite una mejor discriminación de la carga internalizada desde fuera de la célula porque tiene un pKa aproximado de 5 y no presenta fluorescencia hasta que entra en el endosoma y el lisosoma tardíos. El colorante pHrodo Deep Red se puede detectar mediante un conjunto de filtros fluorescentes Cy5 y se ha validado para su uso en diversas aplicaciones, como citometría de flujo, microscopía fluorescente y análisis de alto contenido (HCA).

El kit de etiquetado de células de mamíferos y bacterias pHrodo Deep Red ofrece las siguientes ventajas:
• Multiplexing: el colorante pHrodo Deep Red se puede multiplexar con una amplia variedad de colorantes azules, verdes y rojos, e indicadores como GFP y RFP, MitoSOX Green o Red, CellEvent Caspase 3/7 Green o Red, NucBlue o TMR, entre muchos otros.
• Simplicidad: protocolo paso a paso fácil seguir
• Ventana de señal superior de: el fondo mínimo a pH neutro permite una relación señal-ruido máxima para obtener la máxima certeza en los resultados
• Baja pKa: elimina la señal no específica de la carga no internalizada solo presenta fluorescencia en los endosomas y lisosomas tardíos