Macherey-Nagel™ NucleoBond™ AX 500, Maxi columns kit for transfection-grade plasmid DNA

Descripción

Los kits de purificación NucleoBond™ Plasimid incorporan la tecnología NucleoBond™ AX, un intercambiador de aniones a base de sílice desarrollado para la separación rutinaria de diferentes clases de ácidos nucleicos, permitiendo una actividad biológica superior de los ácidos nucleicos purificados y ofreciendo recuperaciones de alta masa posibles al minimizar los efectos de adsorción no específicos. Las bacterias recolectadas del caldo de cultivo se lisan mediante un procedimiento alcalino/SDS modificado. Tanto el ADN cromosómico como el plasmídico se desnaturalizan bajo estas condiciones alcalinas. El acetato de potasio se añade al lisado desnaturalizado, lo que causa la formación de un precipitado que contiene ADN cromosómico y otros compuestos celulares, lo que neutraliza el lisado. El ADN plasmídico, que permanece en solución, puede volver a su estructura nativa superenrollada. Después de equilibrar la columna NucleoBond™ AX apropiada, se aplica el lisado limpiado y el ADN plasmídico se une a la resina de intercambio de aniones. Después de los siguientes pasos de lavado, el ADN plasmídico purificado se eluye en un tampón con alto contenido en sal y se precipita con isopropanol. Por último, el ADN plasmídico se reconstituye en un tampón TE para su uso posterior. Alternativamente, puede usarse un finalizador NucleoBond™ para la concentración y desalinización de ADN plasmídico eluido. Los filtros plegados NucleoBond™ (incluidos en los kits Midi [PC 100], Maxi [PC 500], Mega [PC 2000] y Giga [PC 10.000]) eliminan el paso de centrifugación después de la lisis alcalina. Los filtros reducen el tiempo de “manipulación” y eliminan los residuos de plástico comunes a otros sistemas de filtración. En aproximadamente 2 min (Midi) y 10 min (Maxi) de funcionamiento sin supervisión, se logra la eliminación completa de SDS y los residuos celulares de muestras plasmídicas. Los filtros plegados NucleoBond™ no inducen el cizallamiento de grandes construcciones de ADN, como PACS o BAC. Tipos de kits y sus componentes: NucleoBond™ Mini (PC 20): Columnas NucleoBond™ AX 20, tampones y ARNasa A. NucleoBond™ Midi (PC 100): Columnas NucleoBond™ AX 100, tampones, ARNasa A y filtros plegados. NucleoBond™ Maxi (PC 500): Columnas NucleoBond™ AX 500, tampones, ARNasa A y filtros plegados XL. NucleoBond™ Mega (PC 2000): Columnas NucleoBond™ AX 2000, tampones, ARNasa A, filtros plegados XL. NucleoBond™ Giga (PC 10.000): Columnas NucleoBond™ AX 10.000, tampones, ARNasa A y filtros plegados. Para obtener más información sobre este producto, póngase en contacto con el servicio de atención al cliente.

• Los filtros plegados NucleoBond™ eliminan el paso de centrifugación para facilitar, agilizar y hacer más cómoda la clarificación del lisado bacteriano
• Las columnas funcionan con flujo por gravedad, lo que permite la purificación de múltiples muestras en paralelo
• Intervalo de trabajo desde nanogramos hasta miligramos de ADN
• La recuperación del ADN plasmídico es > 90 %
• ADN para transfección
• Reproducibilidad entre lotes elevada
• Sin uso de disolventes orgánicos
• Precipitación alcohólica de ADN/ARN. Purificación de ADN plasmídico de alto y bajo número de copias de E. coli adecuada para transfección, secuenciación y clonación.