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Invitrogen™ Kit de ELISA para STAT3 (fosforilado) [pY705] multiespecie
Descripción
Includes
Placa de 96 pocillos recubiertos de anticuerpos para STAT3; patrón de STAT3 [pY705]; tampón diluyente estándar; anticuerpo de detección de STAT3 [pY705]; IgG-HRP anticonejo (100X); diluyente de HRP; concentrado de tampón de lavado (25X); cromógeno estabilizado, TMB; solución de parada; cubiertas de placa; protocolo detallado con pruebas de validación
El kit está diseñado para detectar y cuantificar el nivel de STAT3 (fosforilado) [pY705] en lisados de células humanas frescos o congelados. Se ha observado reactividad cruzada en células de ratón y rata. El ensayo reconoce el STAT3 (fosforilado) [pY705] humano tanto natural como recombinante. Principio del método Se ha recubierto un anticuerpo de captura monoclonal específico para STAT3 (fosforilado) [pY705] en los pocillos de la placa de 96 pocillos. Durante la primera incubación, los patrones y las muestras se pipetan en los pocillos y el antígeno se une al anticuerpo inmovilizado (captura). Después del lavado, se añade a los pocillos un anticuerpo de conejo específico para la proteína objetivo y sirve como anticuerpo de detección al unirse a la proteína inmovilizada capturada durante la primera incubación. Después del lavado, se añade un IgG anticonejo etiquetado como HRP. Esto se une al anticuerpo de detección para completar la estructura tipo sandwich de cuatro miembros. Después de una tercera incubación y lavado para eliminar toda la enzima no ligada, se añade una solución de sustrato (TMB), sobre la que actúa la enzima unida para producir color. La intensidad de este producto coloreado es directamente proporcional a la concentración de proteína objetivo presente en la muestra original y la densidad óptica puede leerse en un lector de microplacas estándar. Validación rigurosa Cada lote ELISA se somete a pruebas de calidad
El STAT3 pertenece a la familia de proteínas STAT (transductor de señales y activador de la transcripción) que son fosforiladas por las quinasas asociadas al receptor, se translocan al núcleo y actúan como factores de transcripción en respuesta a citoquinas y factores de crecimiento. Los coactivadores, como la proteína de unión a CREB, son necesarios para la activación transcripcional por STAT3. El STAT3 también puede activarse mediante interferón alfa, interferón gamma, EGF, PDGF e IL6. La fosforilación en la tirosina 705 por JAK1 y JAK2 es esencial para la formación de dímeros de STAT3, la translocación nuclear y la actividad de unión de ADN. En los seres humanos, el gen STAT3 está localizado en el brazo q del cromosoma 17. Se ha demostrado que el STAT3 se activa con IFN alfa, pero no con IFN beta. Los factores de transcripción asociados con STAT3 son c-Jun y la proteína de fijación del potenciador de respuesta al AMP cíclico (CREB). El STAT3 media en la expresión de diversos genes en respuesta a estímulos celulares y, por lo tanto, desempeña un papel clave en muchos procesos celulares como el crecimiento celular y la apoptosis. Se ha demostrado que la GTPasa Rac1 pequeña fija y regula la actividad del STAT3, mientras que la proteína PIAS3 es un inhibidor específico del STAT3. Se han descrito tres variantes de transcripción empalmadas que codifican isoformas distintivas del STAT3. La eliminación del gen STAT3 en ratones knock-out fue letal en la primera etapa embrionaria.
Información de órdenes
Condición de envío: Hielo húmedo
Especificaciones
Especificaciones
| Número de acceso | P40763,P42227,P52631 |
| Intervalo del ensayo | 1,57-100 U/ml |
| Sensibilidad del ensayo | < 0,9 U/ml |
| Concentración | 1,6 U/ml |
| Conjugado | Peroxidasa de rábano picante (HRP) |
| Tipo de producto | Kit de ELISA |
| Tipo de muestra | Lisados celulares |
| Tipo de sustrato | Factores de transcripción |
| Especies diana | Ratón, rata |
| Para utilizar con (equipo) | Lector de microplacas colorimétrico |
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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
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