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Invitrogen™ Kit de ELISA para IRS1 (fosforilada) [pS312] humana

Código de producto. 10374633
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96 pruebas
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96 tests
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Marca: Invitrogen™ KHO0521

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Includes

Placa de 96 pocillos recubiertos de anticuerpos para IRS1; patrón de IRS1 [pS312]; tampón diluyente estándar; anticuerpo de detección de IRS1 [pS312]; IgG-HRP anticonejo (100X); diluyente de HRP; concentrado de tampón de lavado (25X); cromógeno estabilizado, TMB; solución de parada; cubiertas de placa; protocolo detallado con pruebas de validación

Kit de ELISA tipo sándwich

El kit está diseñado para detectar y cuantificar el nivel de IRS1 (fosforilado) [pY312] en lisados de células humanas frescos o congelados. Se ha observado reactividad cruzada en células de ratón y rata. El ensayo reconoce el IRS1 (fosforilado) [pS312] tanto natural como recombinante. Principio del método Se ha recubierto un anticuerpo de captura monoclonal específico para IRS1 (fosforilada) [pS312] en los pocillos de la placa de 96 pocillos. Durante la primera incubación, los patrones y las muestras se pipetan en los pocillos y el antígeno se une al anticuerpo inmovilizado (captura). Después del lavado, se añade a los pocillos un anticuerpo de conejo específico para la proteína objetivo y sirve como anticuerpo de detección al unirse a la proteína inmovilizada capturada durante la primera incubación. Después del lavado, se añade un IgG anticonejo etiquetado como peroxidasa de rábano picante. Esto se une al anticuerpo de detección para completar la estructura tipo sandwich de cuatro miembros. Después de una tercera incubación y lavado para eliminar toda la enzima no ligada, se añade una solución de sustrato (TMB), sobre la que actúa la enzima unida para producir color. La intensidad de este producto coloreado es directamente proporcional a la concentración de proteína objetivo presente en la muestra original y la densidad óptica puede leerse en un lector de microplacas estándar. Validación rigurosa Cada lote ELISA se somete a pruebas de calidad

El IRS-1, un sustrato principal del receptor de la insulina, se fosforila en respuesta a la estimulación de las células por insulina, el factor de crecimiento semejante a la insulina 1 (IGF-1) e interleucina 4 (IL-4). El IRS-1 se fosforila en residuos de serina, treonina y tirosina en una variedad de tejidos. Una serina/treonina cinasa caseína cinasa II sensible a la insulina media una porción de la fosforilación de la serina/treonina estimulada por la insulina del IRS1 sobreexpresado in vivo. La Thr 502 se identifica como el sitio principal de fosforilación catalizada por la caseína cinasa II en IRS-1 de rata, y la Ser 99 es un sitio adicional de fosforilación catalizada por la caseína cinasa II. Así, la fosforilación catalizada por la caseína cinasa II del IRS-1 puede ser un componente de la cascada de señalización de insulina intracelular. El IRS-1 contiene tres sitios de supuesta unión para 14-3-3 (Ser 270, Ser 374 y Ser 641) y el motivo alrededor de la Ser 270 se encuentra en el dominio de unión de fosfotirosina del IRS-1, que es responsable de la interacción con el receptor de insulina.

Información de órdenes

Condición de envío: Hielo húmedo

TRUSTED_SUSTAINABILITY

Especificaciones

Número de acceso P35568,P35569,P35570
Intervalo del ensayo 1,6-100 U/ml
Sensibilidad del ensayo < 1 U/ml
Concentración 1,6 U/ml
Conjugado Peroxidasa de rábano picante (HRP)
Tipo de producto Kit de ELISA
Tipo de muestra Lisados celulares
Tipo de sustrato Proteínas adaptadoras
Especies diana Ratón, rata
Para utilizar con (equipo) Lector de microplacas colorimétrico
ID de gen (Entrez) 16367, 25467, 3667
Símbolo de gen HIRS-1
Tiempo de incubación 4 h
CV interensayo 7,4%
CV intraensayo 5,8%
Contenido del kit Placa de 96 pocillos recubiertos previamente, Estándar, Tampón de dilución estándar, Anticuerpo de detección, anticonejo-HRP, Diluyente HRP, Tampón de lavado, Cromógeno, Solución de parada, Cubiertas adhesivas para placas
Etiqueta o tinte Peroxidasa de rábano picante (HRP)
Gen marcador IRS-1
Cantidad 96 pruebas
Estado normativo RUO
Volumen de muestra Lisado celular, 10 μL
Requisitos de almacenamiento De 2 °C a 8 °C
Objetivo Humano, ratón, rata
Tiempo de prueba 1 h 20 min
Tiempo total del ensayo 4 h
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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

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