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Invitrogen™ Kit de ELISA para FAK (total) humana

Código de producto. 10314063
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96 pruebas
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96 tests
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Marca: Invitrogen™ KHO0431

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Includes

Placa de 96 pocillos recubiertos de anticuerpos para FAK; patrón de FAK total; tampón diluyente estándar; anticuerpo de detección de FAK total; IgG-HRP anticonejo (100X); diluyente de HRP; concentrado de tampón de lavado (25X); cromógeno estabilizado, TMB; solución de parada; cubiertas de placa; protocolo detallado con pruebas de validación

Kit de ELISA tipo sándwich

El kit de ELISA para FAK (total) humana está diseñado para detectar y cuantificar el nivel de FAK (total) en lisados de células de humanos, ratones o ratas frescos o congelados. El ensayo reconoce la FAK (total) tanto natural como recombinante, independientemente de su estado de fosforilación. Principio del método Se ha recubierto un ac de captura monoclonal específico para FAK (total) en los pocillos de la placa de 96. Durante la primera incubación, los patrones y las muestras se pipetan en los pocillos y el antígeno se une al ac inmovilizado (captura). Después del lavado, se añade a los pocillos un ac de conejo específico para la proteína objetivo y sirve como ac de detección al unirse a la proteína inmovilizada capturada durante la primera incubación. Después del lavado, se añade un IgG anticonejo etiquetado con peroxidasa de rábano picante. Esto se une al ac de detección para completar la estructura tipo sandwich. Tras una tercera incubación y lavado de la enzima no ligada, se añade una solución de sustrato (TMB), sobre la que actúa la enzima unida para producir color. La intensidad de este producto coloreado es directamente proporcional a la concentración de proteína objetivo presente en la muestra original y la densidad óptica puede leerse en un lector de microplacas. Validación rigurosa Cada lote de este kit ELISA se somete a pruebas de calidad como sensibilidad, especificidad, precisión y consistencia entre lotes. Consulte el manual para la validación.

La cinasa de adhesión focal (FAK) es una proteína tirosina cinasa no receptora de 125 kDa que actúa como sustrato para Src y es un elemento clave de la señalización de la integrina. La FAK desempeña un papel importante en la propagación celular, diferenciación, migración, muerte celular y aceleración de la transición de la fase G1 a S del ciclo celular. La tirosina 397 es el sitio de autofosforilación de FAK, y está implicada en su activación inicial. Este sitio fosforilado une los dominios SH2 de la familia Src y la subunidad p85 de la cinasa PI3, y activa la migración celular y la invasión. La FAK tiene un dominio catalítico central y un extremo C-terminal que lo localiza en adhesiones focales, que son sitios donde las células se unen a la matriz extracelular a través de receptores de integrina de superficie. El aumento de la fosforilación de la tirosina FAK se produce tras la conexión de la integrina con la fibronectina. La adhesión de los fibroblastos murinos NIH3T3 a la fibronectina promueve la asociación de la proteína adaptadora Grb2 y de la PTK c-Src con FAK in vivo, y también da lugar a la activación de la cinasa MAP ERK2. En los NIH3T transformados por v-Src3, la asociación de v-Src, Grb2y Sos con FAK es independiente de la adhesión celular a la fibronectina. In vitro el dominio Grb2 SH2 se une directamente a FAK fosforilada por tirosina, y el sitio de unión se ha identificado como Tyr925 por mutagénesis de sitio dirigido. Se han encontrado diversas variantes de transcripción que codifican diferentes isoformas para el gen FAK, pero solo se han determinado las naturalezas completas de tres de ellas.

Información de órdenes

Condición de envío: Hielo húmedo

TRUSTED_SUSTAINABILITY

Especificaciones

Número de acceso O35346,P34152,Q05397
Intervalo del ensayo 1,6-100 ng/ml
Sensibilidad del ensayo <1,6 ng/mL
Concentración De 1,6 a 100 ng/ml
Conjugado Peroxidasa de rábano picante (HRP)
Tipo de producto Kit de ELISA
Tipo de muestra Lisados celulares
Tipo de sustrato Tirosina cinasas citoplasmáticas
Especies diana Ratón, rata
Para utilizar con (equipo) Lector de microplacas colorimétrico
ID de gen (Entrez) 14083, 25614, 5747
Símbolo de gen Ptk2
Tiempo de incubación 4 h
CV interensayo 7,4%
CV intraensayo 4,6%
Contenido del kit Placa de 96 pocillos recubiertos previamente, Estándar, Tampón de dilución estándar, Anticuerpo de detección, anticonejo-HRP, Diluyente HRP, Tampón de lavado, Cromógeno, Solución de parada, Cubiertas adhesivas para placas
Etiqueta o tinte Peroxidasa de rábano picante (HRP)
Gen marcador FAK
Cantidad 96 pruebas
Estado normativo RUO
Volumen de muestra Lisado celular, 10 μL
Requisitos de almacenamiento De 2 °C a 8 °C
Objetivo Humano, ratón, rata
Tiempo de prueba 1 h 20 min
Tiempo total del ensayo 4 h
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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

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