Invitrogen™ Kit de ELISA para CREB (total) humana

Descripción

El kit está diseñado para detectar y cuantificar el nivel de CREB (total) en lisados de células humanas frescos o congelados. Se ha observado reactividad cruzada en células de ratón. El ensayo reconoce la CREB (total) tanto natural como recombinante, independientemente de su estado de fosforilación. Principio del método Se ha recubierto un anticuerpo de captura monoclonal específico para CREB (total) en los pocillos de la placa de 96 pocillos. Durante la primera incubación, los patrones y las muestras se pipetan en los pocillos y el antígeno se une al anticuerpo inmovilizado (captura). Después del lavado, se añade a los pocillos un anticuerpo de conejo específico para la proteína objetivo y sirve como anticuerpo de detección al unirse a la proteína inmovilizada capturada durante la primera incubación. Después del lavado, se añade un IgG anticonejo etiquetado como peroxidasa de rábano picante. Esto se une al anticuerpo de detección para completar la estructura tipo sandwich de cuatro miembros. Después de una tercera incubación y lavado para eliminar toda la enzima no ligada, se añade una solución de sustrato (TMB), sobre la que actúa la enzima unida para producir color. La intensidad de este producto coloreado es directamente proporcional a la concentración de proteína objetivo presente en la muestra original y la densidad óptica puede leerse en un lector de microplacas estándar. Validación rigurosa Cada lote ELISA se somete a pruebas de calidad

La CREB (proteína de unión al elemento de respuesta al AMP cíclico) es un factor de transcripción de cremallera de leucina/básico de 43 kDa que une el elemento de respuesta al AMP cíclico (CRE) y activa la transcripción en respuesta a una variedad de señales extracelulares, lo que incluye neurotransmisores, hormonas, despolarización de membrana y factores de crecimiento y neurotróficos. La activación de la CREB depende de la fosforilación de la serina 133. La fosforilación de la CREB ocurre a través de la cinasa MAP de p44/42 y la p90RSK, y a través de la cinasa MAP de p38 y la MSK1. Aunque la CREB unirá el ADN independientemente de su estado de fosforilación, solo la forma fosforilada es competente como factor de transcripción. La proteína de unión a CREB (CBP), un coactivador transcripcional que interactúa directamente con la CREB, se une a la CREB en la región de la serina 133. La CREB está implicada en diferentes procesos celulares que incluyen la sincronización de los ritmos circadianos, la diferenciación de las células adiposas y el aprendizaje y la memoria. En los seres humanos, el gen se encuentra en el brazo q del cromosoma 2. Las enfermedades asociadas a la disfunción de la CREB incluyen la enfermedad de Alzheimer, el histiocitoma y el melanoma de tejido blando.

Información de órdenes

Condición de envío: Hielo húmedo