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Invitrogen™ Kit de ELISA AKT (total) humano
Descripción
Includes
Placa de 96 pocillos recubiertos de anticuerpos AKT, patrón AKT (total), tampón diluyente estándar, anticuerpo de detección de AKT (total), IgG-HRP anticonejo (100X), diluyente HRP, concentrado de tampón de lavado (25X), cromógeno estabilizado, TMB, solución de parada, cubiertas de placas, protocolo detallado con pruebas de validación.
Este kit está diseñado para detectar y cuantificar el nivel de AKT (total) en lisados de células humanas frescos o congelados. Se ha observado reactividad cruzada en lisados de células de ratón y rata. El ensayo reconoce tanto AKT (total) natural como recombinante, independiente de su estado de fosforilación. Principio del método Se ha recubierto un ac de captura monoclonal específico para AKT (total) en los 96 pocillos de la placa de pocillos. Durante la primera incubación, los patrones de contenido conocido y las muestras desconocidas se pipetan en los pocillos y el antígeno se une al anticuerpo inmovilizado (captura). Después del lavado, se añade a los pocillos un anticuerpo de conejo específico para la proteína objetivo y sirve como anticuerpo de detección al unirse a la proteína inmovilizada capturada durante la primera incubación. Después del lavado, se añade un IgG anticonejo etiquetado como HRP. Esto se une al anticuerpo de detección para completar la estructura tipo sandwich de cuatro miembros. Después de una tercera incubación y lavado para eliminar toda la enzima no ligada, se añade una solución de sustrato (TMB), sobre la que actúa la enzima unida para producir color. La intensidad de este producto coloreado es directamente proporcional a la concentración de proteína objetivo presente en la muestra original y la densidad óptica puede leerse en un lector de microplacas estándar. Validación rigurosa Cada lote ELISA se somete a pruebas de calidad
AKT (proteína quinasa B, PKB, RAS-alfa) es una serina/treonina cinasa de 57 kDa que desempeña un papel importante en distintas respuestas biológicas, como la regulación del metabolismo, la supervivencia celular y el crecimiento por fosforilación de múltiples proteínas. AKT se activa por medio de insulina, PI3K, IGF1 y otros factores de crecimiento y supervivencia. AKT favorece la supervivencia celular mediante la inhibición de la apoptosis a través de la fosforilación y la inactivación de varios objetivos, como los factores de transcripción Forkhead y caspasa-9. Existen tres isoformas mamíferas de Akt: AKT1 (PKB alfa), AKT2 (PKB beta) y AKT3 (PKB gamma) con AKT2 y AKT3 siendo aproximadamente un 82 % idéntico a la isoforma AKT1. Cada isoforma tiene un dominio de homología de pleckstrina (PH), un dominio de cinasa y un dominio regulador terminal carboxi. AKT fue originalmente clonado a partir del retrovirus AKT8 y es un regulador clave de muchas vías de transducción de señales. La vía de AKT es un objetivo importante para las terapias oncológicas donde la disfunción de señalización de AKT ha participado en muchos tipos de cáncer, como por ejemplo, los síndromes de cáncer conocidos como la facomatosis.
Información de órdenes
Condición de envío: Hielo húmedo
Especificaciones
Especificaciones
| Número de acceso | P31749,P31750,P31751,P47196,P47197,Q60823,Q63484,Q9WUA6,Q9Y243 |
| Intervalo del ensayo | 0,3-20 ng/ml |
| Sensibilidad del ensayo | <0,1 ng/mL |
| Concentración | De 0,3 a 20 ng/ml |
| Conjugado | Peroxidasa de rábano picante (HRP) |
| Tipo de producto | Kit de ELISA |
| Tipo de muestra | Lisados celulares |
| Tipo de sustrato | Serina/treonina quinasa |
| Especies diana | Ratón, rata |
| Para utilizar con (equipo) | Lector de microplacas colorimétrico |
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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
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