Invitrogen™ NA-Fluor™ Influenza Neuraminidase Assay Kit

• Diseño eficiente: ensayo de neuraminidasa en un kit completo
• Formulaciones optimizadas: los reactivos del ensayo se han optimizado para conseguir un rendimiento máximo basado en los protocolos NISN
• Aplicación fiable: detección funcional de virus resistentes a NI en poblaciones de virus mixtas
• Función de detección flexible y fácil de usar: señal fluorescente estable que permite el procesamiento por lotes o de alto rendimiento.

Especificaciones

• Color: Azul
• Método de detección: Fluorescente
• Tipo de filtro: Emisión 440-460, excitación 350-365
• Para utilizar con el equipo: Fluorímetro
• Forma: Liofilizado
• Formato: Placa de 96 pocillos
• Compatibilidad con alto rendimiento: Compatible con alto rendimiento

Ensayo de neuraminidasa en un kit completo
El kit de ensayo de neuraminidasa de la gripe NA-Fluor incluye protocolos completos para la titulación de aislados virales según actividad de la neuraminidasa y la realización de ensayos de inhibición de la enzima neuraminidasa. El ensayo también se puede utilizar para controlar la actividad enzimática de la neuraminidasa a partir de fuentes no virales o bacterianas. El kit NA-Fluor contiene reactivos para diez microplacas de 96 pocillos, suficientes para un total de 960 pocillos de ensayo, e incluye los siguientes componentes: sustrato de neuraminidasa fluorescente MUNANA, tampón de ensayo y solución de interrupción para mejorar y estabilizar la señal. El ensayo se realiza en microplacas negras estándar (las microplacas no están incluidas en el kit) y se lee en fluorímetros estándar.

El ensayo de neuraminidasa se compara con los protocolos de NISN
Las formulaciones de los reactivos del ensayo de NA-Fluor están optimizadas para posibilitar la comparación con varios protocolos de ensayo basados en MUNANA bien establecidos, como:

• La concentración de sustrato de MUNANA, la formulación del tampón de ensayo y las condiciones del ensayo son coherentes con los protocolos de determinación de NISN IC-50
• Los datos generados mediante los ensayos NA-Fluor se corresponden con los datos generados con protocolos establecidos basados en MUNANA

Estos parámetros clave permiten a los investigadores cotejar los datos obtenidos durante los periodos de detección de virus resistentes a NI actuales gracias al ensayo NA-Fluor™ con los datos obtenidos a través de los protocolos de ensayo de MUNANA anteriores

Detección funcional de virus resistentes a NI en poblaciones de virus mixtas
El gran cambio en los valores de IC-50 entre el virus sensible al oseltamivir y el resistente a dicho fármaco mediante el ensayo NA-Fluor permite detectar los virus mutantes en muestras virales mixtas. Esto es fundamental para identificar a los virus resistentes en aislamientos clínicos que abarcan poblaciones mezcladas de virus resistentes y sensibles durante los controles de susceptibilidad frente a los NI.

Flexibilidad a la hora de detectar la actividad de la neuraminidasa
El ensayo NA-Fluor proporciona un formato fácil y flexible para analizar varios cientos de aislados virales, o incluso de miles de compuestos en la búsqueda de candidatos potenciales de alto rendimiento con datos de calidad muy fiables. Gracias a su excelente rendimiento, el ensayo tiene un factor Z de entre 0,78 y 0,8, por lo que es perfecto para su uso en pruebas de detección de alto rendimiento. El producto de reacción fluorescente permanece estable durante horas a temperatura ambiente una vez se ha completado el ensayo, lo que permite una mayor flexibilidad en el tiempo de lectura y datos comparables de la primera placa a la última. La señal del ensayo permanece casi constante y los valores de IC-50 son idénticos a los datos recopilados hasta 4 horas después de la finalización del ensayo si se conserva a temperatura ambiente y hasta 4 días después de la finalización del ensayo si se conserva a 4 °C. El ensayo de NA-Fluor se ha optimizado para conseguir criterios de punto final si se lleva a cabo a 37 °C durante una hora después de la incubación previa de NI. Sin embargo, la tasa de renovación del sustrato de MUNANA permanece constante durante más de 2 horas con la neuraminidasa del virus, lo que permite que el ensayo se realice durante tan solo 20 minutos para ahorrar tiempo o durante 2 horas para aumentar la salida de la señal. En el caso de que desee desarrollar el ensayo según sus propios criterios o controlar las tasas de renovación del sustrato en presencia de un inhibidor, este ensayo también se puede llevar a cabo en tiempo real si no se añade la solución de interrupción.