Invitrogen™ EnzChek™ Phospholipase A2 Assay Kit

Estos kits toman el ensayo independiente para la fosfolipasa A2, PLA2 y combinan las Ez y los lípidos necesarios para realizar dos ensayos completos de microplacas de 96 pocillos que controlan la actividad en preparaciones enzimáticas purificadas y lisados celulares. El kit EnzChek de fosfolipasa A2 proporciona suficientes reactivos para dos microplacas, con volúmenes de 200 μl en formato de 96 pocillos para realizar una monitorización fluorométrica continua de PLA2. Este producto ofrece una alternativa al reactivo (B7701), (bis-BODIPY FL C11-PC), y proporciona un sustrato selectivo PLA2 y uno que es radiométrico, lo que reduce las variaciones producidas por la instrumentación y las condiciones del ensayo. La fosfolipasa A2 o PLA2 representa una familia de enzimas que hidrolizan el enlace del éster sn-2 de los fosfolípidos. Las actividades de estas enzimas desempeñan un papel importante en los trastornos cardiovasculares, inflamatorios y del sistema nervioso, así como en los cánceres. El sustrato EnzChek de fosfolipasa A2 proporciona un control rápido, sensible y continuo en tiempo real de las actividades de la enzima PLA2. Este sustrato único es selectivo para PLA2 y puede usarse en un modo de detección de intensidad o en la radiometría. En el modo de detección basado en la intensidad, la actividad PLA2 se controla mediante el aumento de intensidad de una sola longitud de onda a aproximadamente 515 nm. En el análisis radiométrico, que se basa en la distinta emisión de transferencia de energía de resonancia de la fluorescencia (FRET) de este sustrato antes y después de la escisión, la enzima PLA2 se detecta por cambios en la relación de intensidad de la emisión a 515/575 nm con excitación a ≈ 460 nm. Cualquiera de los dos modos de detección proporciona un método sencillo con fondo bajo, alta sensibilidad y alta especificidad para PLA2.

Ensayos de actividad de enzimas y proteínas, actividad de lipasa y fosfopolipasa, proteínas, expresión, aislamiento y análisis