Invitrogen™ LanthaScreen™ TR-FRET PPAR delta Coactivator Assay Kit, goat

Este kit contiene el anticuerpo Tb-anti-GST de cabra; los otros componentes del kit son los mismos que los del kit A15134:

El kit de ensayo del coactivador de PPAR (receptor activado del activador del peroxisoma) delta LanthaScreen™ TR-FRET proporciona un método sensible y sólido para la detección de alto rendimiento de los potenciales ligandos de PPAR delta como agonistas del reclutamiento de coactivadores dependientes de ligandos. El kit utiliza un anticuerpo anti-GST marcado con terbio (Tb), un péptido coactivador marcado con fluoresceína y un dominio recombinante humano de unión a ligando de PPAR delta (PPAR delta-LBD) marcado con glutatión-S-transferasa (GST) en un formato de ensayo homogéneo de mezcla y lectura.

Al ejecutar el ensayo del coactivador de PPAR delta LanthaScreen™ TR-FRET en modo agonista (para identificar compuestos agonistas), se añade PPAR delta-LBD a los compuestos de prueba de ligando, seguido de una mezcla del péptido coactivador marcado con fluoresceína y el anticuerpo anti-GST marcado con Tb. Después de un periodo de incubación a temperatura ambiente, se calcula la relación TR-FRET de 520/495 y se puede utilizar para determinar la EC50 a partir de una curva dosis-respuesta del compuesto. Basado en la biología de la interacción del péptido del coactivador de PPAR delta, este ligando EC50 es un valor compuesto que representa la cantidad de ligando necesaria para unirse al receptor, efectuar un cambio conformacional y reclutar el péptido coactivador (ver figura 1).

Contenido y almacenamiento:
El kit de ensayo del coactivador de PPAR delta LanthaScreen™ TR-FRET contiene proteína PPAR delta-LBD (GST), péptido coactivador C33 marcado con fluorescencia, anticuerpo anti-GST y tampones. Almacene los componentes como se indica en el protocolo del ensayo (-80 °C, -20 °C o 4 °C).