Invitrogen™ Kit de ensayo de coactivadores de CAR TR-FRET LanthaScreen™, cabra

Descripción

Este kit contiene anticuerpos Tb-anti-GST de cabra; otros componentes del kit son iguales a los del kit A15141:

El ensayo de coactivadores del receptor androstano constitutivo (CAR) TR-FRET LanthaScreen™ proporciona un método sensible y robusto para la detección de alto rendimiento (HTS) de los posibles ligandos de CAR como agonistas del reclutamiento de coactivadores dependientes de ligando o agonistas inversos del desplazamiento de coactivadores dependientes de ligando. El kit utiliza un anticuerpo anti-GST etiquetado con terbio, un péptido coactivador etiquetado con fluoresceína y un dominio de unión a ligando de CAR (CAR-LBD) marcado con glutatión-S-transferasa (GST), en un formato de ensayo homogéneo de mezcla y lectura.

Para el ensayo:
Cuando se realiza el ensayo de coactivadores de CAR TR-FRET LanthaScreen™, se añade CAR-LBD a los compuestos problema de ligandos, seguido de la adición de una mezcla de péptido coactivador de fluoresceína y anticuerpo anti-GST etiquetado con terbio. Después de un periodo de incubación a temperatura ambiente, se calcula la relación TR-FRET de 520 nm/495 nm y se puede utilizar para determinar la EC50 a partir de una curva de dosis-respuesta del compuesto. Conforme a la biología de la interacción entre el péptido coactivador de CAR, la EC50 de este ligando es un valor compuesto que representa la cantidad de ligando necesaria para unirse al receptor, efectuar un cambio conformacional y reclutar o desplazar el péptido coactivador (figuras 1 y 2).