Invitrogen™ Kit TOPO™ TA Cloning™ para subclonación, con células E. coli químicamente competentes One Shot™ TOP10

Descripción

Los kits de clonación están disponibles con una serie de células competentes, o sin ellas, dependiendo de sus necesidades y presupuesto. Cada kit utiliza el vector pCR™ 2.1-TOPO TA con prácticos sitios de restricción para subclonación.

Vector pCR 2.1-TOPO TA: simplicidad en clonación y subclonación
El vector pCR 2.1-TOPO TA se linealiza con los salientes 3'-timidina (T) para el ligamiento directo de los productos de PCR amplificados con Taq polimerasa (clonación TA™) y se «activa» con topoisomerasa I unida covalentemente. No hay necesidad de añadir ligasa y la clonación se completa en 5 minutos. Los sitios EcoRI que flanquean el sitio de inserción del producto de PCR permiten una sencilla escisión de insertos o usar cualquier combinación de 15 prácticos sitios de restricción que flanquean el inserto de PCR para una sencilla subclonación direccional.

Manipulación y selección de clones de pCR 2.1-TOPO TA
El vector pCR 2.1-TOPO TA contiene marcadores de resistencia de ampicilina y kanamicina y el gen LacZα para detección azul/blanco.

Clonación simplificada basada en TOPO
Mediante la tecnología de clonación TOPO, no hay necesidad de emplear primers de PCR que contengan secuencias específicas procedimientos posteriores a la PCR, preparación de vectores u otros pasos de manipulación de ADN que consumen mucho tiempo. Solo tiene que añadir la reacción de PCR directamente al vector cargado con la topoisomerasa suministrado, incubar 5 minutos y transformar con las células competentes de E. coli.

Clonación eficiente
Con hasta un 95 % de los clones transportado al inserto deseado, podrá filtrar menos clones y ahorrar tiempo y dinero. El vector pCR 2.1-TOPO TA utilizado en este kit se suministra con extremos 3'-T para una ligación eficaz de productos de PCR amplificados con la Taq polimerasa, que contienen extremos 3'-A.

El estándar de la clonación
En el campo de la clonación, la tecnología de clonación TOPO™ ha sido un socio fiable durante más de diez años para miles de científicos. Rápida, fácil de usar y eficiente, la clonación TOPO se ha aplicado a muchos vectores distintos para multitud de aplicaciones.

Kits TOPO TA Cloning para subclonación: opciones de kits
El kit TOPO TA Cloning para secuenciación puede adquirirse con diversas células competentes que ofrecen distintas ventajas dependiendo de sus necesidades:

• Clonación general: Células TOP10 (n.º de cat. K4500-01, K4500-40)
• Clonación de gran eficacia: Células TOP10 Electrocomp™ (n.º de cat. K4560-01, K4560-40)
• Clonación general, resistencia T1 bacteriófaga: Células DH5α-T1R (n.º de cat. K4520-01, K4520-40)
• Crecimiento rápido: E. Coli Mach1™ -T1R químicamente competente (n.º de Nº K4510-20)
• Utilice sus propias células: flexibilidad y ahorro (n.º de de cat. 450641)

También ofrecemos dos versiones del kit que incluyen un kit de minipreparación rápida de plásmidos PureLink™ (n.º de cat. K4500-02 y K4510-02) para utilizar en el aislamiento de un plásmido recombinante limpio y listo para secuenciación.

• Rápido y fácil: de PCR a clones en solo tres pasos y en tan solo 5 minutos de manipulación
• Eficiente: obtenga hasta el 95 % de clones con el inserto adecuado
• Probado: rendimiento fiable durante más de una década con más de 4000 citas
• Sencillo: no se requieren ligasas, procedimientos posteriores a la PCR ni primers de PCR con secuencias específicas
• Vector: Vector pCR 2.1-TOPO TA: vector de subclonación con 15 prácticos sitios de restricción que flanquean al inserto para una subclonación direccional sencilla
• Método de clonación: Clonación TA TOPO: Ligación en 5 minutos con base de Topoisomerasa I de productos PCR con salientes 3 ft.-A (amplificados con polimerasa Taq) al vector TOPO con salientes T
• Células competentes: varias opciones: seleccione entre kits con células generales, de alta eficacia, con resistencia T1 bacteriófaga y competentes de rápido crecimiento o utilice las suyas propias

Aplicaciones:
clonación, clonación por PCR

Información de órdenes

Condición de envío: Hielo seco