Invitrogen™ TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with pCR™II Vector and One Shot™ TOP10F' Chemically Competent E. coli

Los promotores T7 y SP6 del vector pCR II permiten la transcripción in vitro del inserto para producir productos con sentido o antisentido. El promotor doble del kit de clonación TA usa el vector de clonación pCRII y ligasa de ADN T4 ExpressLink para generar un producto de ligadura en un paso de ligadura de quince minutos a temperatura ambiente. Las reacciones normalmente producen > 80 % de recombinantes que contienen insertos.

• Rápido y práctico: ligadura a temperatura ambiente en 15 minutos
• Eficaz: cribaje azul/blanco y > 80 % de los clones con inserto adecuado
• Flexible: elección de resistencia a kanamicina o ampicilina para la selección flexible de antibióticos
• Sin complicaciones: elimina cualquier modificación enzimática del producto de PCR
• Optimizado: no requiere el uso de primers de PCR que contengan sitios de restricción
• Salientes 3'-T para ligadura directa de productos de PCR amplificados con Taq
• Promotores T7 y Sp6 para transcripción y secuenciación de ARN in vitro
• Poliligador versátil flanqueado con sitios EcoR I para facilitar la escisión de insertos
• Sitios de primer directo e inverso M13 para secuenciación

• Cómo funciona la clonación TA\
• La polimerasa Taq tiene una actividad no dependiente de plantilla que añade una sola desoxiadenosina (A) a los extremos 3' de los productos PCR
• El vector linealizado suministrado en este kit tiene residuos de una sola desoxitimidina 3' (T)
• Esto permite a los insertos de PCR ligar eficazmente con el vector
• Configuraciones del kit
• El kit TA Cloning se ofrece en una variedad de configuraciones: con E. coli químicamente competente One Shot INVF’ (K2050-01 y K2050-40), E. coli químicamente competente One Shot TOP10F’ (K2060-01 y K2060-40) y sin células competentes (K2750-20 y K2750-40) en tamaños de kit de reacción de 20 y 40

Clonación, clonación por PCR