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Invitrogen™ TA Cloning™ Kit, with pCR™2.1 Vector and One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli
Descripción
El kit TA Cloning™ usa el vector de clonación pCR™2.1 y ligasa de ADN T4 ExpressLink™ para generar un producto de ligadura en un paso de ligadura de quince minutos a temperatura ambiente. Las reacciones normalmente producen > 80 % de recombinantes que contienen insertos.
- Rápido y práctico: ligadura rápida y cómoda en 15 minutos a temperatura ambiente
- Eficaz: cribaje azul/blanco y > 80 % de los clones con inserto adecuado
- Flexible: elección de resistencia a kanamicina o ampicilina para la selección flexible de antibióticos
- Sin complicaciones: elimina cualquier modificación enzimática del producto de PCR
- Optimizado: no requiere el uso de primers de PCR que contengan sitios de restricción
El vector pCR™2.1 proporciona:
- Salientes 3′-T para ligadura directa de productos de PCR amplificada con Taq
- Promotor T7 para transcripción y secuenciación de ARN in vitro
- Poliligador versátil flanqueado con sitios EcoR I para facilitar la escisión de insertos
- Sitios de primer directo e inverso M13 para secuenciación
Cómo funciona TA Cloning™
La polimerasa Taq tiene una actividad no dependiente de plantilla que añade una sola desoxiadenosina (A) a los extremos 3′ de los productos de PCR. El vector linealizado suministrado en este kit tiene residuos de una sola desoxiadenosina 3′ (T). Esto permite a los insertos de PCR ligar eficazmente con el vector.
Otras configuraciones de kits
Los kits TA Cloning™ también se ofrecen sin células competentes (K2020-20, K2020-40), con E. coli químicamente competente Oneshot™ INVF’ (K2000-01, K2000-40) o con E. coli químicamente competente OneShot™ TOP10F’ (K2030-01, K2030-40).
Especificaciones
Especificaciones
| Cepa bacteriana o de levadura | TOP10 |
| Tipo de célula | E. coli químicamente competente |
| Método de clonación | TA Cloning |
| Contenido y almacenamiento | Los kits TA Cloning™ contienen el vector pCR™2.1 linealizado, la ligasa de ADN T4 ExpressLink™, el tampón de ligación de ADN T4 5X ExpressLink™, dNTPs, el tampón de PCR 10X, agua esterilizada y controles. Los kits de células competentes contienen E. coli químicamente competente One Shot™, medio SOC y un plásmido de control superenrollado. Almacene el E. coli de One Shot™ a - 80 °C. Almacene todos los demás componentes a - 20 °C. Se garantiza la estabilidad de todos los reactivos durante 6 meses si se almacenan correctamente. |
| Formato | Kit |
| Para utilizar con (aplicación) | Clonación PCR |
| N.º de reacciones | 20 reacciones |
| Línea de productos | One Shot™ |
| Tipo de producto | Kit de clonación |
| Promotor | T7 |
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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
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