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Descripción
Thermo Scientific™ KpnI está disponible como enzima FastDigest, que se usa para la digestión rápida del ADN. Más del 95 % de los fragmentos del ADN digerido pueden ligarse y recortarse si el extremo 5′ presenta una concentración de 0,02 μm después de una sobredigestión con 50 veces la cantidad recomendada (3 U/μg de ADN x 17 horas) de KpnI.
5'..G G T A C▵C...3'
3'..C▵C A T G G...5'
Condiciones para una actividad del 100 %:
- 1 tampón KpnI: 10 mm de Tris-HCl (pH 7,5 a 37 °C), 10 mm de MgCl2, 0,02 % de Triton X-100 y 0,1 mg/ml de BSA
- Incubar a 37 °C.
Tampón de almacenamiento:
- KpnI se suministra en: 10 mm de Tris-HCl (pH de 7,5 a 25 °C), 50 mm de KCl, 1 mm de DTT, 0,1 mm de EDTA, 0,2 mg/ml de BSA y 50 % (v/v) de glicerol
Efectos de metilación:
- Dam: nunca se solapa, sin efecto.
- Dcm: puede solaparse, sin efecto.
- CpG: puede solaparse, sin efecto.
- EcoKI: nunca se solapa, sin efecto.
- EcoBI: nunca se solapa, sin efecto.
Digestión del ADN integrado en agarosa:
- Se requieren como mínimo 5 u de la enzima para la digestión completa de 1 μg de ADN lambda integrado en agarosa en 16 horas
Nota:
La concentración alta de glicerol (> 5 %), un pH >8,0 o un gran exceso de la enzima pueden producir actividad estrella (star activity).
Especificaciones
Especificaciones
| Concentración | 50 U/μl |
| Sensibilidad a la metilación | No es sensible a la metilación dam, no es sensible a la metilación dcm, no es sensible a la metilación CpG, no es sensible a la metilación dcm, no es sensible a la metilación CpG |
| Enzima | Kpn I |
| Tampón compatible | Tampón único (10X tampones KpnI) |
| Sensible a la inactivación del calor | Sí |
| Temperatura óptima de reacción | 37 °C |
| RE de tipo IIS | No |
| Cantidad | HC; 20000 U |
| Tipo de producto | Enzima de restricción |
| Categoría de investigación | Clonación tradicional |
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
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