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Descripción
Las endonucleasas de restricción convencionales representan una gran colección de enzimas de restricción de alta calidad, optimizadas para funcionar en uno de los tampones del sistema de cinco tampones. Además, se proporciona el tampón universal Tango para mayor comodidad en digestiones dobles. Todas las enzimas muestran una actividad del 100 % en las condiciones de reacción y tampón recomendadas. Para garantizar uniformidad en el rendimiento, los tampones de enzimas de restricción Thermo Scientific contienen BSA previamente mezclada, lo que mejora la estabilidad de numerosas enzimas y fija sustancias contaminantes que pueden estar presentes en preparaciones de ADN.
5'..G G N▵N C C...3'
3'..C C N▵N G G...5'
Condiciones para una actividad del 100 %:
- 1 tampón Tango: 33 mM de Tris-acetato (pH 7,9 a 37 °C), 10 mM de Mg-acetato, 66 mM de K-acetato y 0,1 mg/ml de BSA
- Incubar a 37 °C.
Tampón de almacenamiento:
- BspLI se suministra en: 10 mm de Tris-HCl (pH 7,4 a 25 °C), 200 mm de NaCl, 1 mm de DTT, 1 mm de EDTA, 0,2 mg/ml de BSA y 50 % (v/v) de glicerol
Ligadura y refragmentación:
- Tras una sobredigestión con una cantidad 50 veces mayor a la recomendada de BspLI, más del 90 % de los fragmentos de ADN pueden ligarse y más del 95 % pueden recortarse
Efectos de metilación:
- Dam: nunca se solapa, sin efecto.
- Dcm: puede solaparse, reducción de fragmentación.
- CpG: puede solaparse, reducción de fragmentación.
- EcoKI: nunca se solapa, sin efecto.
- EcoBI: nunca se solapa, sin efecto.
Nota:
La fragmentación con BspLI se reduce debido a la metilación de dcm solapante. Para evitar metilación dcm, utilice una cepa con dam-, dcm-, como GM2163 (M0099).
Especificaciones
Especificaciones
| Concentración | 10 U/μl |
| Sensibilidad a la metilación | Es sensible a la metilación CpG, no es sensible a la metilación CpG, no es sensible a la metilación dam, no es sensible a la metilación CpG, no es sensible a la metilación dam |
| Enzima | BspLI (NlaIV) |
| Tampón compatible | Tampón Tango 10X |
| Sensible a la inactivación del calor | Sí |
| Temperatura óptima de reacción | 37 °C |
| RE de tipo IIS | No |
| Cantidad | 200 U |
| Tipo de producto | Enzima de restricción |
| Categoría de investigación | Clonación tradicional |
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
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