Thermo Scientific™ EZ-Link™ Maleimide-PEG Solid-Phase Biotinylation Kit - Mini-Spin Columns

Este innovador sistema de etiquetado de anticuerpos utiliza agarosa quelada con níquel para inmovilizar temporalmente las moléculas de anticuerpos a través de sus regiones FC ricas en histidina. Una vez que se mantiene en su lugar sobre la resina, el anticuerpo puede reducirse suavemente en la región de bisagra para producir sulfhidrilos libres que luego se biotinilan con el reactivo de Maleimida-PEG2-Biotina. El exceso de reactivo de marcado y subproductos se eliminan antes de recuperar el anticuerpo etiquetado y purificado de la resina utilizando una solución de imidazol suave. No se necesita filtración de gel ni diálisis. Se ofrecen kits para reacciones a pequeña escala (anticuerpo de 0,1 a 1 mg) y a escalas más grandes (anticuerpo de 1 a 10 mg).

Características destacadas: 

Etiquetado y purificación rápidos: todo el procedimiento solo se lleva a cabo dos horas

Fácil eliminación del exceso de reactivos de marcación y de los reactivos gastados: basta con lavar los subproductos de la reacción. No hay necesidad de diálisis o filtración en gel

Sin efectos de dilución: el método de fase sólida permite recuperar anticuerpos inicialmente diluidos en un volumen más pequeño después del etiquetado

Protocolos optimizados: protocolos específicos para los anticuerpos que garantizan una reducción suave de los disulfuros y un nivel adecuado de marcado para minimizar la posibilidad de inactivación

Reactivo de biotina de alto rendimiento: la Malemida-PEG2-Biotina utiliza química de maleimida específica de sulfhidrilo eficiente e incluye un separador de polietilenglicol hidrófilo (PEG) que estabiliza la solubilidad a largo plazo de los anticuerpos etiquetados

Ocho experimentos de etiquetado de biotina por kit: el envasado sin peso Thermo Scientific garantiza que el reactivo de biotina esté completamente activo para ocho experimentos diferentes

Detalles del producto:

Los kits de biotinilación en fase sólida EZ-Link utilizan una estrategia innovadora para la biotinilación de anticuerpos que simplifica el proceso en muchos aspectos, haciendo posible que tanto el principiante como el experto obtengan una biotinilación exitosa. La estrategia consiste en inmovilizar el anticuerpo en un soporte de afinidad quelado metálico y en realizar la biotinilación en la fase sólida. Los anticuerpos se unen fácilmente a los soportes quelados metálicos, como el níquel o el cobalto, uniéndose principalmente a través de la región Fc rica en histidina de los anticuerpos de clase IgG. Esta característica permite que la química de derivatización se realice fácilmente mientras el anticuerpo está unido al soporte. Esta estrategia facilita la administración de reactivos y la eliminación de reactivos gastados. El anticuerpo modificado resultante se elimina de forma selectiva del soporte mediante elución con una solución tamponada de imidazol. El enfoque en fase sólida de la biotinilación de anticuerpos proporciona un mayor control sobre la reacción. Por ejemplo: Las proporciones de reactivos y anticuerpos y los tiempos de reacción pueden ajustarse para lograr el grado adecuado de biotinilación según la aplicación prevista. Los kits contienen un reactivo soluble acuoso específico del grupo de sulfhidrilos (Maleimida-PEG2-Biotina) que se dirige a los grupos accesibles de sulfhidrilo (-SH) en la superficie del anticuerpo. El formato se puede aplicar al nivel de anticuerpo multimiligramo en el kit de columna de 1 ml (n.º de referencia 21920) o a niveles bajos de anticuerpos de microgramo para biotinilaciones mediante el kit de minicolumna de centrifugación (n.º de referencia 21930).