Applied Biosystems™ cAMP-Screen Direct™ Cyclic AMP Immunoassay System

• Combina un sustrato quimioluminiscente y altamente sensible CSPD™ con el potenciador SAPPHIRE-II™ que se activa con un conjugado enzimático compuesto por cAMP unido a fosfatasa alcalina (cAMP-AP)
• La formulación de sustrato/potenciador quimioluminiscente lista para su uso genera una emisión de luz de brillo constante a partir de los 30 minutos después de la adición
• Se utiliza principalmente en el cribaje secundario y en la investigación preclínica, donde la sensibilidad y la ausencia de falsos positivos son esenciales
• Más sensibilidad que cualquier otro ensayo de cAMP disponible en el mercado
• Horas de tiempo de lectura con poca o ninguna degradación de la señal
• Protocolo sencillo con células cultivadas directamente en la placa de ensayo
• Útil para una amplia variedad de estudios de activación de receptores

Alta sensibilidad y horas de resplandor constante
Este ensayo quimioluminiscente está diseñado para proporcionar más sensibilidad que cualquier otro ensayo de cAMP disponible en el mercado. Se pueden detectar hasta 60 femtomoles de cAMP. El ensayo tiene un amplio rango dinámico, por lo que es capaz de detectar de 0,06 a 6 000 picomoles de cAMP sin necesidad de diluir o manipular las muestras como en la acetilación. Esto es especialmente útil en ensayos basados en células, ya que se mide la estimulación y la inhibición de los agonistas o antagonistas acoplados a GS o Gi. La precisión intraensayo para las muestras duplicadas suele ser del 5 % o menos. Una vez que la formulación sustrato/potenciador alcanza la señal de brillo, la placa se puede leer durante horas con poca o ninguna degradación de la señal. Esto es útil en procesos de cribaje en los que se comparan varias placas entre sí. Además, el ensayo muestra una reactividad cruzada excepcionalmente baja con otros nucleótidos cíclicos o que contienen adenosina.

Para estudios de activación de receptores
El sistema cAMP-Screen está diseñado para la cuantificación de cAMP celular para ensayos funcionales de activación de receptores. El ensayo se ha utilizado con líneas celulares establecidas para mediciones funcionales con receptores endógenos, líneas celulares con receptores de ligando exogenados expresados en la superficie celular, cultivos celulares primarios y tejidos en respuesta al tratamiento con los ligandos apropiados. Además, se ha utilizado para la caracterización de receptores, la identificación de receptores huérfanos con ligandos y la caracterización de nuevos receptores quiméricos. El ensayo se puede utilizar para cribaje de alto rendimiento de compuestos que estimulan o interfieren con estas vías de transducción de señales.

Especificaciones

• Objetivo: AMP cíclico
• Tiempo de incubación del ensayo: 1 h
• Sensibilidad del ensayo: 60 femtomoles de cAMP
• Método de detección: Quimioluminiscente
• Para utilizar con (equipo): Lector de microplacas
• Etiqueta/tinte: Fosfatasa alcalina
• Tipo de muestra: Lisados celulares
• Volumen de la muestra: 60 μl
• Almacenamiento: Almacenar a una temperatura de entre 2 y 8 °C