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Invitrogen™ Illumina™ TotalPrep™-96 RNA Amplification Kit
Sistema completo para generar ARN biotinilado amplificado para hibridación con matrices Illumina™ Sentrix™
Marca: Invitrogen™ 4393543
Detalles adicionales : Peso : 5.08000kg
Includes: 110 μl de primer T7 Oligo(dT); 110 μl de transcriptasa inversa ArrayScript™; 220 μl de tampón de primera cadena 10X; 880 μl de mezcla de dNTP; 110 μl de inhibidor de ARNasa; 110 μl de ARNasa H; 1,1 ml de tampón de segunda cadena 10X; 220 l de ADN polimerasa; 275 μl de mezcla de enzimas T7; 275 μl de mezcla de biotina-NTP; 10 μl de ARN de control; 20 ml de cDNAPure; 1,1 ml de gránulos de unión de ARN; 40 ml de concentrado de tampón de lavado de ADNc; 5,5 ml de concentrado de tampón de unión de ARNc; 450 μl de solución de resuspensión de gránulos; 25 ml de concentrado de solución de lavado de ARNc; 10 ml de tampón de elución de ARNc; 8 placas de fondo en U; 8 placas de PCR; 20 ml de agua sin nucleasas
Descripción
Uso del kit de amplificación de ARN TotalPrep-96
El kit de amplificación de ARN TotalPrep-96 incorpora numerosas mejoras a la reacción de transcripción in vitro (IVT) en comparación con el anterior kit de TotalPrep. La reacción IVT se ha optimizado para un etiquetado de la biotina más eficaz. Se ha añadido al kit una mezcla NTP que contiene UTP biotinilado, lo que permite una facilidad de uso y un etiquetado óptimo. Estas modificaciones en el kit han aumentado significativamente la sensibilidad, proporcionando un aumento del porcentaje de llamadas presentes y una amplificación de una sola ronda con solo 50 ng de ARN de entrada. El kit se basa en el protocolo de amplificación de ARN desarrollado en el laboratorio de James Eberwine (Van Gelder et al. 1990). El procedimiento consta de la transcripción inversa con un primer oligo(dT) que se enfrenta a un promotor T7 con RT ArrayScript™, una transcriptasa inversa (RT) diseñada para obtener una mayor producción de ADNc de primera cadena que las enzimas tipo salvaje. ArrayScript cataliza la síntesis de prácticamente todo el ADNc de longitud completa, que es la mejor manera de garantizar la producción de muestras de micromatrices reproducibles. El ADNc se somete a la síntesis de segunda cadena y a una limpieza basada en magnetismo para convertirse en plantilla de transcripción in vitro con ARN polimerasa T7. Para maximizar la producción de ARNc, se utilizan la tecnología de transcripción in vitro (IVT) MEGAscript™, junto con la UTP de biotina (suministrada en el kit), para generar cientos de miles de copias de ARN biotinilado antisentido de cada ARNm de una muestra.
Productos acompañantes
Es necesario un soporte con anillo magnético de 96 pocillos para utilizar este kit. El soporte con anillo magnético de 96 pocillos (n.º cat. AM10050) están diseñados y se recomiendan para la precipitación de gránulos paramagnéticos a partir de microplacas estándar de 96 pocillos con fondo en U. El soporte con anillo magnético permite sedimentar los gránulos magnéticos en forma de círculo, lo que permite eliminar fácilmente el sobrenadante con un robot o pipetas multicanal.
- Realice la amplificación desde solamente 50 ng de ARN de entrada
- Desarrollado para la creación de perfiles de expresión con los chips de gránulos Sentrix
- Bio-16-UTP ahora incluido en la mezcla NTP optimizada, reduciendo el tiempo de configuración y maximizando el etiquetado
- Incluye reactivos suficientes para 96 reacciones
Etiquetado de matrices de expresión, análisis de expresión génica y genotipado, análisis de micromatriz, amplificación de ARN
Información de órdenes
Condición de envío: Aprobado para su envío en hielo húmedo o seco
Especificaciones
| Kit de amplificación de ARN | |
| Sí | |
| ArrayScript™ | |
| Illumina Sentrix™ | |
| Ambion™, Illumina™ TotalPrep™ |
| • 110 µl del primer de T7 Oligo(dT) (-20 °C) • 110 µl de transcriptasa inversa ArrayScript™ (-20 °C) • 220 µl de tampón de primera cadena 10X (-20 °C) • 880 µl de mezcla dNTP (-20 °C) • 110 µl de inhibidor de la ARNasa (-20 °C) • 110 µl de ARNasa H (-20 °C) • 1,1 ml de tampón de segunda cadena 10X (-20 °C) • 220 µl de ADN polimerasa (-20 °C) • 275 µl de mezcla de enzimas T7 (-20 °C) • 275 µl de mezcla de Biotina-NTP (-20 °C) • 10 µl de ARN de control (-20 °C) • 20 ml de cDNAPure (4 °C) • 1,1 ml de gránulos de unión de ARN (4 °C) • 40 ml de concentrado de tampón de lavado de ADNc (temperatura ambiente) • 5,5 ml de concentrado de tampón de unión de ARNc (temperatura ambiente) • 450 µl de solución de resuspensión de gránulos (temperatura ambiente) • 25 |
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| Etiquetado directo | |
| ARN Poly(A+), ARN total | |
| Kit | |
| 96 reacciones |
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.