Invitrogen™ Power SYBR™ Green Cells-to-C_T™ Kit

El kit Ambion Power SYBRGreen Cells-to-C_T™ es un método rápido, sencillo y sólido para pasar directamente de células cultivadas a resultados de PCR en tiempo real. Esta tecnología de última generación de lisis celular y estabilización de ARN elimina por completo el laborioso y lento proceso de purificación de ARN. El kit Power SYBRGreen Cells-to-C_T funciona con ADN polimerasa AmpliTaq Gold™, LD, que proporciona los niveles más altos de especificidad con PCR estándar en tiempo real.

• Incluye reactivos optimizados para trabajar de forma eficiente y listos para usar
• La tecnología Cells-to-C_T es simple y eficaz y permite la preparación de muestras a temperatura ambiente en solo siete minutos, incluido el tratamiento con ADNasa
• Precisión validada, reproducibilidad excepcional y sensibilidad máxima de 10 a 100 000 células por muestra; resultados equivalentes a los del ARN purificado

Valor excepcional: el kit incluye reactivos para la preparación de muestras integrados en un flujo de trabajo de expresión génica completo y optimizado que incluye reactivos de transcripción inversa y una mezcla maestra de PCR de alto rendimiento con SYBRGreen.
Extraordinaria facilidad: el protocolo comienza con un sencillo procedimiento de preparación de muestras de siete minutos. En primer lugar, las células se lavan en PBS y se lisan durante cinco minutos a temperatura ambiente; el tratamiento de ADNasa se puede realizar de forma simultánea. La reacción de lisis se detiene y la muestra está lista para la transcripción inversa o el almacenamiento a - 20 °C durante un máximo de cinco meses. Puesto que las muestras se pueden procesar directamente en placas de cultivo (96 o 384 pocillos), la manipulación de muestras y la posibilidad de pérdida de muestras o de error de transferencia se reducen al mínimo, lo que da como resultado una mayor reproducibilidad. Tras la preparación de la muestra, se añade una parte del lisado celular a una reacción de RT seguida de una PCR en tiempo real con la mezcla maestra incluida.
Rendimiento extraordinario: para demostrar el rendimiento del kit, se han realizado experimentos de replicación con purificación de ARN tradicional y análisis de PCR en tiempo real o con el kit Power SYBRGreen Cells-to-C_T. El kit muestra un rendimiento equivalente a los resultados obtenidos con ARN purificado para el análisis de 10 a 100 000 células. Además, se ha demostrado que la sensibilidad, la eficiencia y el rango dinámico eran superiores a los kits de lisados de la competencia. Las muestras preparadas con el kit se han probado para comprobar su compatibilidad en diversas plataformas de PCR en tiempo real, incluidas las de Applied Biosystems, Roche y Bio-Rad.

• Método PCR: qRT-PCR de dos pasos
• Grado de calidad o pureza: LD (DAN bajo)
• Colorante de referencia pasiva: ROX (premezclado)
• Polimerasa: ADN polimerasa AmpliTaq Gold™

Producto accesorio:
El kit de control SYBRGreen Cells-to-C_T (n.º de referencia 4402959) contiene un conjunto de ARN de control y cebador Xeno™ y se recomienda para controlar la eficacia de la lisis celular y la inhibición de amplificación en las reacciones Cells-to-C_T.

Análisis de expresión génica y genotipado, PCR y PCR en tiempo real, PCR en tiempo real (qPCR), perfilado de expresión génica basado en PCR en tiempo real, PCR en tiempo real a partir de muestras directamente