Invitrogen™ Stabilized Blood-to-C_T™ Nucleic Acid Preparation Kit for qPCR, compatible with either PAXgene™ or Tempus™ Blood RNA Tubes

Descripción

El kit de preparación de ácidos nucleicos estabilizados Blood-to-C_T™ para qPCR permite un análisis directo a partir de una alícuota de 500 μl de sangre humana completa recogida en tubos de ARN PAXgene™ o Tempus™ sin la purificación convencional de ARN. Este procedimiento sencillo crea un lisado que puede ir directamente a la transcripción inversa y PCR en tiempo real con la sensibilidad y especificidad equivalente al ARN purificado convencionalmente. Este kit ahorra tiempo, genera muchos menos residuos y ofrece un flujo de trabajo sencillo adecuado para unas pocas muestras o que se puede incorporar fácilmente en aplicaciones automatizadas de alto rendimiento.
Flujo de trabajo simple sin perder sensibilidad ni especificidad El proceso consiste en sedimentar y lavar una alícuota de 500 μl del tubo de sangre y, después, un paso único de digestión/ADNasa que preserva la integridad del ARN. La preparación tiene lugar completamente a temperatura ambiente, a diferencia de otros productos que requieren pasos de incubación a una temperatura específica. Se pueden preparar hasta 96 muestras en menos de una hora, la mitad del tiempo que tarda la purificación competitiva de columnas de centrifugación en procesar solo 12 muestras, con menos esfuerzo práctico. El lisado resultante puede pasar directamente a reacciones qRT-PCR de un paso o de dos pasos o almacenarse para su uso posterior (1 hora a 4 °C o 5 meses congelado). Este procedimiento sencillo se lleva a cabo en el mismo pocillo de procesamiento de muestras, de principio a fin, lo que significa que no se transfieren las muestras. Reactivos de transcripción inversa para síntesis de ADNc, mezclas maestras TaqMan y ensayos TaqMan para análisis de PCR en tiempo real disponibles por separado.

El número total de reacciones de transcripción inversa y PCR posibles a partir de una muestra inicial depende de los requisitos mínimos de muestra de los kits de RT-PCR deseados. Consulte la documentación del usuario para obtener más información.
Seleccionar, descubrir o validar Para usuarios con genes específicos de interés, el kit de preparación de ácidos nucleicos estabilizados Blood-to-C_T para qPCR fue diseñado para permitir el cribado rápido a partir de una pequeña cantidad de muestra inicial (aproximadamente el 5 % del volumen total de un tubo de ARN sanguíneo PAXgene o Tempus llenado correctamente por muestra). El resto del tubo de sangre se puede archivar para su uso posterior o purificar según sea necesario. Quienes realicen experimentos de descubrimiento o validación con análisis RT-PCR en tiempo real ahorrarán esfuerzo, tiempo y costes generales con el kit de preparación de ácidos nucleicos estabilizados Blood-to-C_T para qPCR, a la vez que se emplea un proceso escalable que permite a los laboratorios superar las dificultades de la purificación convencional y, finalmente, empezar a procesar las muestras con facilidad. Análisis de miARN Con el creciente énfasis en el ARN no codificado y su papel regulador en el desarrollo y la enfermedad, estranquilizador saber que estas pequeñas pero importantes moléculas de ARN pueden detectarse correctamente con el kit de preparación de ácidos nucleicos estabilizados Blood-to-C_T para qPCR. Los científicos han probado el lisado con el kit de transcripción inversa de MicroARN TaqMan Applied Biosystems y la mezcla maestra universal TaqMan II frente a un amplio panel de ensayos de microARN TaqMan y han generado resultados iguales o mejores que los del producto de purificación miARN del competidor líder.
Reducción del espacio y menos residuos para más ahorro Los productos competitivos, especialmente los métodos basados en columnas, generan cantidades considerables de residuos plásticos y biológicos peligrosos por muestra (columnas de centrifugación, puntas, tubos de microcentrífuga y reactivos). El kit de preparación de ácidos nucleicos estabilizados Blood-to-C_T para qPCR simplifica el flujo de trabajo, por lo que la cantidad total de residuos plásticos es un 75 % menor en peso para un número comparable de muestras procesadas a través de columnas. El kit no genera residuos orgánicos. También se reduce el espacio para maximizar la capacidad del congelador. La eliminación de menos residuos peligrosos y el menor consumo de plástico se traducen en un ahorro de costes , así como en una reducción del impacto medioambiental.

• Detecte ARN total de PAXgene (incluido el miARN) o tubos de ARN en sangre Tempus sin purificación
• Rápido: prepare 96 muestras para RT-PCR en tiempo real basadas en TaqMan en menos de 1 hora
• Resistente: muestra de 500 μl procesada a temperatura ambiente con resultados equivalentes a los del ARN purificado
• Formato flexible: las muestras se pueden preparar en tubos de microcentrífuga o placas de 96 pocillos manuales/automatizadas
• Compatible con qRT-PCR de 1 paso, 2 pasos y protocolos automatizados, compatible con alto rendimiento

Los datos de RT-PCR en tiempo real generados a partir del lisado son equivalentes a los resultados obtenidos a partir del ARN purificado convencionalmente de los mismos tubos y se han validado con los siguientes reactivos de qPCR:

• Kit de ARN a ADNc de alta capacidad Applied Biosystems y mezcla maestra de expresión génica TaqMan
• Kit de síntesis de ADNc Invitrogen SuperScript™ VILO™ y mezcla maestra de expresión génica TaqMan
• Kit de transcripción inversa de MicroARN TaqMan Applied Biosystems y mezcla maestra universal TaqMan II
• Kit de reactivos de mezcla maestra para RT-PCR en un paso TaqMan Applied Biosystems

• Compatibilidad: tubos de ARN sanguíneo PAXgene y Tempus
• Tiempo de procesamiento: inferior a 1 hora
• Formato: tubos de microcentrífuga, placas de 96 pocillos
• Número de preparaciones: 50 reacciones

Para usuarios que necesitan purificación completa: Si todavía se requiere la purificación de ARN convencional para el tubo de sangre remanente, puede utilizar el kit de aislamiento de ARN MagMAX para tubos de sangre estabilizados. Este producto maximiza su producción de ARN total de los tubos de ARN sanguíneo Paxgene (incluyendo miARN) o Tempus mediante tecnología comprobada de separación basada en partículas magnéticas.

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PAXgene™ y PreAnalytiX™ son marcas registradas de PreAnalytiX GmbH. En este documento no se implica ningún patrocinio, promoción o afiliación.