PCR y qPCR
1. Preparación de la muestra
La preparación de muestras para PCR o qPCR suele requerir la extracción y purificación del material nuclear. Dependiendo de la fuente de la muestra, esto puede implicar la manipulación mecánica a través de la homogeneización o requerir el uso de resinas o perlas para ayudar a unir los ácidos nucleicos antes de la purificación. Prepare sus muestras con la ayuda de los kits de extracción, aislamiento y purificación de ADN y ARN, además de reactivos, tampones y mucho más.
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2. Amplificación PCR
La amplificación se realiza combinando un segmento de ADN, polimerasa, solución de nucleótidos y cebadores en un tubo o microplaca de PCR. Se utiliza un termociclador para realizar los siguientes pasos, repitiendo el proceso de 35 a 40 veces.
Desnaturalización: se rompen los enlaces de hidrógeno, el ADN se separa.
Hibridación: los cebadores y la polimerasa se unen al ADN.
Extensión: los nucleótidos se emparejan con el ADN para formar una nueva cadena complementaria.
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3. PCR de transcripción inversa (RT-PCR) y RT-qPCR
En la PCR de transcripción inversa, el ARN se convierte en ADN complementario (ADNc) utilizando la transcriptasa inversa. Luego este ADNc se amplifica mediante PCR o PCR a tiempo real (qPCR). Las aplicaciones habituales de la PCR en tiempo real detectan genes expresados, examinan variantes de transcripción y crean plantillas de ADNc para procedimientos de clonación y secuenciación. A continuación encontrará polimerasas, oligonucleótidos, Master Mix y mucho más para sus ensayos de PCR en tiempo real.
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4. Cuantificación qPCR
La PCR en tiempo real se utiliza para detectar secuencias específicas de ADN. Este método utiliza tintes o sondas fluorescentes para determinar la cantidad de material amplificado en la muestra. Encuentre una variedad de Master Mix, además de instrumentos, ensayos y kits de PCR en tiempo real para cuantificar sus resultados de qPCR.
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5. Suministros esenciales
Encuentre cabinas para PCR con filtro HEPA que le ayudarán a mantener las partículas contaminantes fuera de su espacio de trabajo. Compre tubos y tiras de tubos de PCR de un solo uso, microplacas, cabinas de PCR y otro material de laboratorio certificado como libre de DNAsa, RNAsa, DNA y otros posibles contaminantes.
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