Histología

En el proceso de inclusión, las muestras de tejido en sus casetes y el material de inclusión líquido (como la cera de parafina) se colocan en moldes y se dejan endurecer. Los bloques endurecidos que contienen las muestras de tejido están listos para ser seccionados. La inclusión también puede realizarse utilizando tejido congelado, no fijado, en un medio a base de agua, normalmente un glicol o resina a base de agua.

En la fase de seccionamiento, el tejido se corta en secciones muy finas (3-5 µm; 1000 µm = 1 mm) con un micrótomo. Estos cortes, normalmente más finos que la célula media, se colocan en un portaobjetos de cristal para su tinción. El tejido congelado e incluído en un medio de congelación se corta con un micrótomo en un criostato.

Las tinciones de rutina se realizan para dar contraste al tejido que se examina. La hematoxilina y la eosina (H y E) son las tinciones más utilizadas en histología.

La hematoxilina se combina con un mordiente metálico, como el aluminio, y el complejo hematoxilina-aluminio se utiliza para teñir los núcleos celulares de azul/negro. La eosina es la contratinción más utilizada en la tinción rutinaria de secciones de tejido. La mejor tinción con eosina se produce a pH 4,5 a 5 y, cuando se utiliza correctamente, pueden obtenerse múltiples tonos de rosa. Los eritrocitos, el colágeno y el citoplasma de las células epiteliales o musculares deben teñirse de diferentes tonos de rosa cuando se utiliza eosina. Tras la tinción, las secciones deben montarse para proteger la muestra, lo que requiere el uso de un medio de montaje y un cubreobjetos.