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LanthaScreen™ LanthaScreen™ TR-FRET ER beta Coactivator Assay Kit
Descripción
- El kit de ensayo del coactivador LanthaScreen™ TR-FRET ER beta proporciona un método sensible y robusto para el cribado analítico masivo de los potenciales ligandos beta de receptor de estrógenos (ER) como agonistas o antagonistas del reclutamiento de coactivador dependiente de ligando. El kit utiliza un dominio de unión a ligando ER beta (ER beta-LBD) marcado con glutatión S-transferasa (GST), un anticuerpo anti-GST marcado con terbio (Tb) y un péptido coactivador marcado con fluoresceína en un formato de ensayo homogéneo de mezcla y lectura.
- Modo agonista: para ejecutar el ensayo de coactivador LanthaScreen TR-FRET ER beta en modo agonista (para identificar compuestos agonistas), se añade ER beta-LBD a los compuestos de ensayo de ligando, seguido de la adición de una mezcla de péptido coactivador de fluoresceína y anticuerpo Tb-anti-GST. Después de la incubación a temperatura ambiente, se calcula la relación de emisión TR-FRET 520:495 y se utiliza para determinar la EC50 a partir de una curva de respuesta de dosis del compuesto. Basado en la biología de la interacción del péptido ER beta-coactivador, este ligando EC50 es un valor compuesto que representa la cantidad de ligando necesaria para unirse al receptor, efectuar un cambio conformacional, y reclutar el péptido coactivador.
- Modo antagonista: cuando el kit de ensayo de coactivador LanthaScreen TR-FRET ER beta se ejecuta en modo antagonista (para identificar los compuestos antagonistas), se agrega ER beta-LBD a los compuestos de prueba de ligando, seguido de la adición de una mezcla de agonista, péptido coactivador de fluoresceína y anticuerpo Tb-anti-GST. La concentración de agonista utilizada en este modo es la concentración de EC80 determinada por la primera ejecución del ensayo en modo agonista.
- Incluye:
- 1 tubo de proteína recombinante de dominio de unión a ligando ER beta (almacenar entre -68 y -85 °C)
- 1 tubo de péptido (almacenar entre -5 y -30 °C)
- 2 frascos de tampón TR-FRET (almacenar entre -5 y -30 °C)
- 1 vial de Tb-anti-GST Ab (almacenar entre -5 y -30 °C)
- 1 tubo de DTT (almacenar entre -5 y -30 °C)
Especificaciones
Especificaciones
| Contenido y almacenamiento | 1 tubo de proteína recombinante de dominio de unión a ligando ER beta (almacenar entre -68 y -85 °C) 1 tubo de péptido (almacenar entre -5 y -30 °C) 2 frascos de tampón TR-FRET (almacenar entre -5 y -30 °C) 1 vial de Tb-Anti-GST Ab (almacenar entre -5 y -30 °C) 1 tubo de DTT (almacenar entre -5 y -30 °C) |
| Para utilizar con (aplicación) | Ensayo de interacción de cofactores, ensayo de receptores nucleares |
| Línea de productos | LanthaScreen |
| Cantidad | 800 ensayos de 20 μL |
| Tipo | Kit de ensayo de coactivadores TR-FRET ER beta |
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Título del producto
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