Thermo Scientific™ Kit de extracción de ADN RapidOut

Descripción

El kit de extracción de ADN Thermo Scientific™ RapidOut elimina de forma rápida y segura el ADN genómico de las preparaciones de ARN total y ARNm. La digestión completa del ADN y la extracción segura de la ADNasa I de la reacción de digestión se garantizan sin pasos perjudiciales para el ARN, como el calentamiento o la extracción orgánica. En primer lugar, la muestra de ARN se trata con ADNasa I recombinante libre de ARNasa hasta niveles por debajo del límite de detección mediante PCR rutinaria. La ADNasa I se elimina de forma segura posteriormente mediante el reactivo de extacción de ADNasa (DRR) patentado.

El DRR une eficazmente la ADNasa I y el complejo se recoge en la parte inferior del tubo por centrifugación. El ARN purificado se recoge como sobrenadante. El ARN después del procedimiento RapidOut está libre de contaminación por ADN y libre de ADNasa I. Está listo para usarse en diferentes aplicaciones, lo que incluye la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR) o punto final, la clonación, los micromatices y el Northern blotting.

El kit de extracción de ADN Thermo Scientific RapidOut elimina de forma rápida y segura el ADN genómico de las preparaciones de ARN total y ARNm. La digestión completa del ADN y la extracción segura de la ADNasa I de la reacción de digestión se garantizan sin pasos perjudiciales para el ARN, como el calentamiento o la extracción orgánica. En primer lugar, la muestra de ARN se trata con ADNasa I recombinante libre de ARNasa hasta niveles por debajo del límite de detección mediante PCR rutinaria. La ADNasa I se elimina de forma segura posteriormente mediante el reactivo de extracción de ADNasa (DRR) patentado.
DRR une eficazmente la ADNasa I y el complejo se recoge en la parte inferior del tubo por centrifugación. El ARN purificado se recoge como sobrenadante. El ARN después del procedimiento RapidOut está libre de contaminación por ADN y libre de ADNasa I. Está listo para usarse en diferentes aplicaciones, lo que incluye la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR) o punto final, la clonación, los micromatices y el Northern blotting.
Características destacadas

Eliminación de ADN de ARN antes de análisis Northern blot

Peligroso: no
> Control de calidad: ensayo de ribonucleasa
>Para DRR:>
> No se detectó ARNasa contaminante después de la incubación de 10 μl de DRR con 160 ng de transcripción de ARN de 2 kb durante 4 horas a 37 °C.
>Para ADNasa I:>
> No se detectó ARNasa contaminante después de la incubación de 5 u de ADNasa I con 160 ng de transcripción de ARN de 2 kb durante 4 horas a 37 °C.
>Eficiencia de extracción de ADNasa I
> Muestra de ARN después de que el procedimiento RapidOut se incube con 1 μg de ADN plasmídico superenrollado durante 15 minutos a 37 °C. Menos del 20 % del ADN superenrollado se transformó en formas melladas y lineales.
>Prueba funcional
>Del kit:>
> La DRR se prueba funcionalmente en la reacción de amplificación de RT-qPCR con ARN tratado con el kit de extracción de ADN RapidOut.
>de ADNasa I:>
> La ADNasa I se prueba funcionalmente en un ensayo de actividad unitaria: una unidad de la enzima degrada completamente 1 μg de ADN de pUC19 en 10 min a 37 °C.
> Condiciones de almacenamiento: 20 °C

Aplicaciones principales

• Aislamiento de ARN y análisis de ARN, en especial RT-qPCR y RT-PCR (clientes que realizan análisis de expresión de genes de bajo nivel de transcripción)
• Clientes que realizan la síntesis de ADNc-ds a partir de preparaciones de ARN completas

Otras aplicaciones

• Eliminación del ADN del ARN para microinyecciones y transfección
• Eliminación del ADN del análisis previo de micromatrices de ARN
• Eliminación del ADN del ARN antes del análisis de Northern blot