Thermo Scientific™ Phusion U Hot Start PCR Master Mix

La ADN polimerasa Thermo Scientific Phusion U es una enzima innovadora de alta fidelidad desarrollada con tecnología de fusión. Debido a una mutación patentada en el llamado bolsillo de unión dUTP de Phusion, Phusion U supera una importante limitación de las enzimas de corrección: es capaz de incorporar dUTP y leer a través del uracilo presente en las plantillas de ADN.
Además de la posibilidad de uso del uracilo, Phusion U ofrece todas las propiedades superiores de otras ADN polimerasas Phusion: gran precisión, velocidad, capacidad de amplicones largos hasta 20 kb y una alta especificidad con Affibody basado en el inicio en caliente. Estas características hacen de la ADN polimerasa Phusion U Hot Start una opción excelente para aplicaciones tan importantes como la amplificación de ADN convertido o dañado de bisulfito, así como el uso de control de contaminación cruzada.
La ADN polimerasa Phusion U Hot Start también está disponible en los formatos mezcla maestra y Green. La mezcla maestra para PCR Phusion U Hot Start es una práctica mezcla 2X diseñada para minimizar el número de pasos de pipeteo. El usuario solo tiene que añadir la plantilla y los primers. El formato Phusion U Green es una combinación de ADN polimerasa Phusion U Hot Start y tampones 5X Phusion Green. Los tampones incluyen un reactivo de densidad y dos colorantes de seguimiento para la carga directa de los productos de PCR en un gel. El tampón coloreado no interfiere en el rendimiento Phusion U y es compatible con aplicaciones posteriores, como la secuenciación, el ligamiento o la digestión de enzimas de restricción.
Aspectos destacados
•Precisión: ADN polimerasa de muy alta fidelidad (Taq 25x)
•Tolerancia al uracilo: se ha diseñado para incorporar dUTP y amplificar moldes que contienen uracilo
•Specificidad: inicio en caliente para reducir la amplificación inespecífica y la degradación del cebador.
•Velocidad: tiempos de extensión cortos (15-30 s/kb)
• Carga directa de productos para PCR en geles
Aplicaciones
• Amplificación de ADN convertido con bisulfito
• Amplificación de ADN dañado o envejecido
• Control de contaminación cruzada
• Métodos de clonación basados en escisión de uracilo (USER)
Incluye lo siguiente:
ADN polimerasa Phusion U Hot Start (F-555)
• ADN polimerasa Phusion U Hot Start, 2 U/μl
• Tampón de alta fidelidad Phusion 5X
• Tampón GC Phusion 5X
• DMSO
Tanto el tampón de alta fidelidad Phusion como el tampón GC Phusion proporcionan 1,5 mm de MgCl₂ en la concentración final 1X.
ADN polimerasa Phusion U Green Hot Start (F-556)
• ADN polimerasa Phusion U Hot Start, 2 U/μl
• Tampón de alta fidelidad Phusion Green 5X
• Tampón de CG Phusion Green 5X
• DMSO
Tanto los tampones Phusion Green HF como los tampones Phusion Green GC proporcionan 1,5 mm de MgCl₂ en la concentración final 1X.
Mezcla maestra para PCR de inicio en caliente Phusion U Hot Start
• Mezcla maestra para PCR Phusion U 2X (ADN polimerasa Phusion U Hot Start, tampón de reacción 2X, 3 mm de MgCl₂, 400 μm de cada dATP, dTTP, dCTP y dGTP)
• Agua sin nucleasas

Peligroso: no
> Tampón de almacenamiento: 20 mm de Tris-HCl (con un pH de 7,4 a 25 °C), 0,1 mm de EDTA, 1 mm de DTT, 100 mm de KCl, estabilizadores y glicerol (50 %).
> Condiciones de almacenamiento: 20 °C