Invitrogen™ SYBR™ Green Fast Advanced Cells-to-CT™ Kit

El kit SYBR Green Fast Advanced Cells-to-Ct es un sistema completo de lisado celular diseñado para el análisis de expresión génica directamente de células cultivadas sin purificación de ARN. Los reactivos para lisis celular SYBR Green Fast Advanced Cells-to-Ct se suministran con la mezcla de enzimas de transcripción inversa Cells-to-Ct Fast Advanced de mayor sensibilidad, el tampón RT 2X y la mezcla maestra PowerUp SYBR Green de primera clase. El kit SYBR Green Fast Advanced Cells-to-Ct le ofrece la sensibilidad que necesita en el flujo de trabajo más rápido disponible: obtenga resultados de análisis de expresiones génicas de una placa completa de células en aproximadamente 1,5 horas.

• Completo: el flujo de trabajo optimizado incluye reactivos para lisis celular con eliminación de ADNg, nueva mezcla de enzimas Fast Advanced RT, tampón, y la nueva mezcla maestra avanzada PowerUp SYBR Green Fast
• Rápido: preparación de muestras en 7 minutos, lo que incluye el tratamiento de ADNasa, a temperatura ambiente
• Fácil: lise muestras en un tubo o directamente en placas de cultivo
• Sólido: realice análisis de expresión génica de entre 10-100.000 células por muestra; los resultados son equivalentes a los que se obtienen con ARN purificado
• Eficaz: contiene reactivos suficientes para generar 1000 resultados de PCR en tiempo real a partir de 100 muestras iniciales

Método exclusivo que elimina la necesidad de aislar ARN de células cultivadas
El método Cells-to-Ct presenta un exclusivo reactivo para lisis que lisa las células y protege el ARN. La extracción de ADN se produce simultáneamente en el paso de lisis de 5 minutos para ahorrar tiempo y mejorar la facilidad de uso. La lisis se detiene mediante la adición de una «solución de parada» que se une irreversiblemente a los reactivos para lisis.

El kit SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT contiene reactivos de transcripción inversa (RT) Cells-to-Ct Fast Advanced para la síntesis de ADNc y la mezcla maestra PowerUp SYBR Green para el análisis de PCR en tiempo real. Los conjuntos de cebadores los proporciona el usuario.

Preparación de muestras sencilla en 7 minutos
El kit SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT está diseñado para 10-100 000 células/muestra cultivadas. Las células se lavan en PBS y se lisan en la solución para lisis durante cinco minutos a temperatura ambiente; el tratamiento de ADNasa se puede realizar simultáneamente. Para finalizar la lisis, las células se deben someter a un proceso de incubación de 2 minutos con solución de parada a temperatura ambiente. Los lisados ya están listos para la transcripción inversa o el almacenamiento a -20 °C durante un corto plazo o -80 °C durante un largo plazo.

Maximice la sensibilidad de la detección
A diferencia de algunos kits de la competencia que limitan la cantidad de lisado en la reacción de RT al 10 %, el kit SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT puede albergar el 45 % del volumen total de reacción de RT como lisado celular. Además, el ADNc puede constituir hasta el 30 % del volumen de la reacción de PCR en tiempo real. El elevado volumen de lisados en la reacción de RT optimizada, junto con el elevado volumen de ADNc que se obtiene en la posterior PCR en tiempo real con la mezcla maestra PowerUP SYBR Green producen una sensibilidad máxima. La mezcla maestra amplifica el objetivo de forma precisa y exacta, y permite la detección de pequeñas cantidades de objetivo, como transcripciones expresadas a niveles bajos.

Reducción de la pérdida de muestras y del error de transferencia
Dado que las muestras se pueden procesar directamente en pocillos de cultivo (96 o 384 pocillos), la manipulación de las muestras y la posibilidad de pérdida de las muestras o de error de transferencia se reducen al mínimo, lo que permite disfrutar de un procesamiento de alto rendimiento rápido. A diferencia de los antiguos protocolos de aislamiento de ARN compuestos por varios pasos, con este kit no es necesario llevar a cabo ningún paso de calentamiento, lavado o centrifugación. El kit simplifica enormemente un laborioso proceso de 30–60 minutos y lo reduce a 7 minutos.

Rendimiento contrastado, probado en conjunto
Todos los componentes del kit SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT se han optimizado para un rendimiento uniforme y fiable. Esto elimina las conjeturas que implica el montaje de kits de preparación de muestras, RT y PCR en tiempo real independientes, lo que le proporciona la sensibilidad que necesita en el flujo de trabajo de respuesta a la muestra más rápido disponible.