Invitrogen™ SuperMix de síntesis de primera cadena SuperScript™ III para qRT-PCR

• La sencilla y rápida preparación de la reacción solo utiliza dos tubos: una mezcla de reacción 2X y una mezcla de enzimas.
• La mezcla de enzimas de transcriptasa inversa SuperScript III, incluida en la mezcla de enzimas de transcriptasa inversa, es una versión de transcriptasa inversa de M-MLV que se ha diseñado para reducir la actividad ARNasa H y proporcionar mayor estabilidad térmica. La enzima se puede utilizar para sintetizar ADNc en un intervalo de temperatura de 42° a 60°C, y proporciona una mayor especificidad, mayor producción de ADNc y más cantidad de producto de cadena completa que otras transcriptasas inversas.
• Puesto que la transcriptasa inversa SuperScript III no se ve significativamente inhibida por el ARN de transferencia y ribosómico, se puede emplear para sintetizar ADNc a partir de ARN total
• El inhibidor de ribonucleasa recombinante RNaseOUT, también incluido en la mezcla de enzimas, es una proteína inhibidora de ARNasa que protege frente a la degradación del ARN objetivo debido a la contaminación por ribonucleasas de la preparación de ARN

Mezcla de reacción La mezcla de reacción de transcriptasa inversa 2X incluye oligo(dT)₂₀, hexámeros aleatorios, MgCl₂, y dNTIP en una formulación de tampón que se ha optimizado para qRT-PCR. ARNasa H E. coli se suministra como un tubo independiente en el kit para eliminar la plantilla de ARN de la molécula híbrida ADNc:ARN después de la síntesis de la primera cadena. Se ha demostrado que esto aumenta la sensibilidad de qRT-PCR. Uso de SuperMix de síntesis de primera cadena SuperScript III Esta formulación de SuperMix se puede utilizar para cuantificar menos de 10 copias de un gen objetivo en qRT-PCR, con un amplio rango dinámico que admite una cuantificación precisa de ARNm de alto número de copias de hasta 1μg de ARN total. Los reactivos se proporcionan para 50 o 250 reacciones de transcriptasa inversa de 20 μl cada una. Temperatura óptima de reacción: 50°C.

PCR y PCR en tiempo real, transcripción inversa