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Thermo Scientific™ Pierce™ Phosphoprotein Phosphate Estimation Assay Kit
Tienda Thermo Scientific ProductosDescripción
El kit de estimación de fosfatos de fosfoproteínas Thermo Scientific™ permite clasificar e identificar proteínas como fosforiladas (serina y treonina), y también determinar semicuantitativamente el nivel de fosforilación.
El kit de ensayo de estimación de fosfatos de fosfoproteínas está diseñado para facilitar la determinación de la presencia y el grado de fosforilación en muestras de proteínas purificadas. El ensayo se basa en la hidrólisis alcalina del fosfato de residuos de serilo y treonilo en fosfoproteínas y la cuantificación del fosfato liberado con verde de malaquita y molibdato amónico. El ensayo se realiza fácilmente en microplacas de 96 pocillos o en tubos de ensayo, y tarda aproximadamente una hora.
El ensayo puede utilizarse para identificar si una proteína purificada contiene fosfoserina (p-Ser) o fosfotreonina (p-Thr), así como para estimar el grado de este tipo de fosforilación. Para la cuantificación, la muestra de proteína se compara con concentraciones específicas de fosvitina, una fosfoproteína de grado de fosforilación conocido. El paso de hidrólisis alcalina no libera fosfato de residuos de fosfotirosina (p-Tyr) en enlaces peptídicos. Por lo tanto, un resultado negativo de una preparación de una proteína purificada desconocida indica que la proteína, o bien (1) no es una fosfoproteína o (2) está fosforilada exclusivamente en residuos de tirosina. En el último caso, para distinguir entre estas dos posibilidades será necesario un análisis por Western blot con un anticuerpo antifosfotirosina.
Características destacadas:
Específico: mide solamente la fosfoserina (p-Ser) y la fosfotreonina (p-Thr); no mide la fosfotirosina (p-Tyr)
- Práctico: incluye protocolos para tubos de ensayo y para microplacas de 96 pocillos, y su realización requiere menos de 90 minutos
Semicuantitativo: calcula moles de fosfato (P) por mol de proteína utilizando el patrón de fosvitina incluido
Adaptable: el formato puede adaptarse para desarrollar ensayos específicos de fosfoproteínas puras cuando se disponga de patrones previamente caracterizados
Incluye:
Solución de molibdato amónico, solución de verde de malaquita, paquete de solución salina tamponada con Tris
Recomendada para:
Identificar proteínas que contengan fosforilaciones de fosfoserina o fosfotreonina; Estimar la cantidad de fosforilación de pS y pT; Desarrollar ensayos cuantitativos específicos para fosfoproteínas de interés previamente caracterizadas
Especificaciones
Especificaciones
| Contenido y almacenamiento | Suficiente para: 500 ensayos de tubos o 1920 ensayos de microplacas • Solución de molibdato amónico, 25 ml • Solución de malaquita verde, 75 ml • Control positivo de fosvitina, 1 mg • Paquete de TBS (hace 500 ml), 1 paquete Tras su recepción, almacene los componentes a temperatura ambiente. Una vez disuelta, almacene la solución de fosvitina a 4 °C (o –20 °C para su almacenamiento a largo plazo). |
| ensayo | Ensayo de estimación de fosfatos de fosfoproteína |
| Método de detección | Colorimétrico |
| Línea de productos | Pierce |
| Tipo de producto | Estimación de fosfatos de fosfoproteína |
| Especificidad | Sin especificidad |
| Suficiente para | 500 ensayos en tubo o 1920 ensayos en microplaca |
| Para utilizar con (aplicación) | Detección basada en soluciones, absorbancia |
| Para utilizar con (equipo) | Espectrofotómetro, lector de microplacas |
| Cantidad | 100 ml |
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
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