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Descripción
La inmunoprecipitación suele ser necesaria para la detección y cuantificación de proteínas de baja abundancia o eventos de señalización raros. El análisis de espectrometría de masas se basa en dos métodos para la detección de proteínas de baja abundancia: monitorización de reacciones individuales (SRM) y monitorización de reacciones paralelas (PRM), que permiten el aislamiento, la programación y la cuantificación de péptidos proteotípicos seleccionados. Estos kits de IP se han optimizado para una inmunoprecipitación y coinmunoprecipitación eficaces de las proteínas objetivo, y son directamente compatibles con la preparación y el análisis de muestras de MS posteriores.
• Sensible: el procedimiento enriquece con éxito las proteínas de baja abundancia (rango de ng bajo)
• Bajo fondo: las muestras enriquecidas contienen residuos mínimos de detergente
• Contaminación de anticuerpos reducida: la biotinilación de anticuerpos con enriquecimiento de estreptavidina reduce la contaminación en el eluato en comparación con otros métodos IP
• Resistente: el procedimiento y los reactivos se han verificado con numerosos objetivos para garantizar un enriquecimiento constante de proteínas de baja abundancia (rango de ng) con al menos dos péptidos identificados por proteína.
El kit de IP magnético compatible con Pierce MS de Thermo Scientific (proteína A/G) utiliza partículas magnéticas de proteína A/G Pierce de alta calidad para proporcionar una mayor flexibilidad de captura de anticuerpos que la proteína A o G sola. El kit de IP magnético compatible con MS Thermo Scientific Pierce (estreptavidina) utiliza partículas magnéticas de estreptavidina Pierce de alta calidad para su uso con anticuerpos biotinilados, que se pueden adquirir comercialmente o etiquetados con el kit de biotinilación de anticuerpos Pierce para IP. Después del procedimiento de inmunoprecipitación, la fracción de elución enriquecida con objetivo está lista para la digestión tríptica en solución para el análisis de LC-MS sin necesidad de purificación de gel, eliminación de detergente o desalinización. Además, los reactivos y los procedimientos se han validado mediante separación magnética manual y automatizada.
Aplicaciones
• Enriquecimiento de objetivos de baja abundancia para mejorar la sensibilidad a la MS
• Identificación de proteínas objetivo que no son detectables mediante western blotting
• Cuantificación de proteínas objetivo mediante análisis de LC-MS
• Detección de anticuerpos para IP-MS
Especificaciones
Especificaciones
| Descripción | Partículas magnéticas de proteína A/G |
| Para utilizar con (equipo) | Kingfisher™ Flex, soporte magnético |
| Tipo de producto | Kit IP magnético |
| Línea de productos | Pierce |
| Suficiente para | 40 reacciones |
| Contenido y almacenamiento | Partículas magnéticas de proteína A/G,1 ml Tampón de lisis celular IP-MS, 100 ml Tampón de lavado a IP-MS, 75 ml Tampón de lavado B IP-MS, 40 ml Tampón de elución IP-MS, 6 ml MgCl2 (1 m), 0,75 ml Almacenar en refrigerador (de 2 °C a 8 °C). |
| Material de partida | Muestras de proteínas, lisado celular |
| Tipo de producto final | proteína |
| Método de detección | Espectrometría de masas |
| Formato | Kit |
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