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Descripción
Polimerasa altamente procesiva (hasta más de 70 kb) que presenta una fuerte actividad de desplazamiento de la cadena, la ADN polimerasa Thermo Scientific™ phi29 permite una amplificación isotérmica de ADN muy eficaz. La ADN polimerasa phi29 también posee una actividad exonucleasa (corrección) de 3’ → 5' que actúa preferentemente en ADN monocatenario o ARN. Por tanto, se recomiendan los cebadores modificados de la posición 3’.
Aspectos destacados
• Una mayor actividad procesiva y de desplazamiento de hebras entre las ADN polimerasas conocidas: se pueden sintetizar más de 70 kb de tramos de ADN
• Síntesis de ADN muy precisa
• Producción extremadamente alta de ADN amplificado incluso a partir de cantidades diminutas de plantilla
• Los productos de amplificación se pueden utilizar directamente en aplicaciones posteriores (PCR, digestión restrictiva, identificación de genotipos de SNP, etc.)
Aplicaciones
• Amplificación de círculo rodante (RCA): generación de nanoplantillas de ADN periódicas
• Amplificación de desplazamiento múltiple (MDA)
• Amplificación neutral del genoma completo (WGA, ver figura 1 en datos de apoyo):
• Amplificación de ADN para la detección de SNP y STR
• Amplificación sin células de ADN a partir de células individuales
• Organismos patógenos o metagenomas
• Amplificación de ADN a partir de muestras de manchas de sangre en papel de filtro
• Preparación de plantillas de ADN para secuenciación
• Amplificación de ADN con primado de proteínas
• Genotipado in situ con sondas candado
• Clonación basada en recombinación
• Clonación de ADN letal sin células
• Amplificación de ADN primado de ARN
Nota
La adición de pirofosfatasa a la mezcla de reacción con ADN polimerasa phi29 puede mejorar la síntesis de ADN.
El uso de esta enzima en determinadas aplicaciones puede estar asegurado por patentes y puede requerir una licencia.
Especificaciones
Especificaciones
| Tipo de producto | Stand-alone enzyme |
| Para utilizar con (aplicación) | MDA-WGA, RCA |
| Polimerasa | phi29 DNA Polymerase |
| Cantidad | 10 μg (1000 U) |
| Contenido y almacenamiento | • phi29 DNA Polymerase (1,000 units at 10 U/μL) • 10X Reaction Buffer for phi29 DNA Polymerase • Store at –15 to –25°C. |
| Temperatura óptima de reacción | 30°C |
| Condiciones de envío | Dry Ice |
| Concentración | 10 U/μL |
| Tiempo de reacción | 4 hours |
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
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