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OPTIZYME™ SacI, Fisher BioReagents™

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Código de producto. 11914782 Proveedor Fisher BioReagents N.º de proveedor BP80161
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Descripción

5'...G A G C T^C...3'
3'...C^T C G A G...5'

Suministrado con: Tampón OPTIZYME Ecl136II, SacI 10X
Condiciones pare el 100 % de actividad:

  • Tampón OPTIZYME Ecl136II, SacI 1X: 10 mM de bis-Tris propano-HCl (pH 6,5 a 37 °C), 10 mM de MgCl2 y 0,1 mg/ml de BSA
  • Incube a 37°C
Actividad enzimática en los tampones OPTIZYME:
  • Tampón 1: 50 - 100 %
  • Tampón 2: 20 - 50 %
  • Tampón 3: 0 - 20 %
  • Tampón 4: 50 - 100 %
  • Tampón 5: 0 - 20 %
Tampón de almacenamiento:
  • 10 mM de Tris-HCl (pH 7,4 a 25 °C), 100 mM de KCl, 1 mM de DTT, 1 mM de EDTA, 0,2 mg/ml de BSA y glicerol al 50 % (v/v)
  • Ligadura y reescisión:
  • Más del 95 % de los fragmentos de ADN pueden ligarse y volver a cortarse después de una sobredigestión con 50 veces la cantidad recomendada de SacI.
  • Digestión del ADN integrado en agarosa:
  • Se requiere un mínimo de 5 unidades de SacI para la digestión completa de 1 μg de ADN del fago lambda incluido en agarosa en 16 horas.
  • Notas:
    • SacI es sensible a la metilación de la citosina en GAGmCTC pero no en GAGCTmC e insensible a la metilación de la adenina en GmAGCTC/. AluI metiltransferasa (AGmCT) puede utilizarse para bloquear SacI.
    • Los plásmidos superenrollados pueden necesitar hasta 5 veces más SacI para una digestión completa, en comparación con el ADN linealizado.
    • SacI es inhibido por anticoagulantes clínicos comunes que se encuentran en algunas preparaciones de sangre periférica anticoagulada y de médula ósea. Se ha demostrado que los niveles de EDTA y ACD (ácido cítrico-citrato de sodio-glucosa) en la preparación de una muestra estándar inhiben la SacI. Se necesita tres veces la concentración normal de heparina para inhibir SacI.
    Extremos compatibles: Alw21I, Eco24I, SduI
    Efectos de la metilación:
    Dam: Nunca se solapa (sin efecto)
    Dcm: nunca se solapa; sin efecto
    CpG puede solaparse (sin efecto)
    • 5'...m5C GAGCTm5C G...3'
  • 3'... Gm5CTCGA Gm5C...5'
  • (Sin efecto sobre la escisión)
  • EcoKI: nunca se solapa; ningún efecto.
  • EcoBI: puede solaparse (sin efecto)
    • 5'...TGm6AGCTC(N)4 TGCT...3'
  • 3'...AC TCGAG(N)4 m6ACGA...5'
  • (Sin efecto sobre la escisión)

    • TRUSTED_SUSTAINABILITY

    Especificaciones

    Concentración 10 U/μl
    Componentes Tampón OPTIZYME™ Ecl136II, SacI 10X
    Temperatura de la incubadora 37 °C
    pH 7,4
    Para utilizar con (aplicación) > 95 % de los fragmentos de ADN pueden ligarse y volver a cortarse después de una sobredigestión con 50 veces la cantidad recomendada de SacI.
    Tampón de almacenamiento 10 mM de Tris HCl (pH 7,4 a 25 °C), 100 mM de KCl, 1 mM de EDTA, 1 mM de DTT, 0,2 mg/ml de BSA, glicerol al 50 %
    Cantidad 2000 U
    Sitio de corte GAGCT.C
    Tipo de producto SacI
    Formulario Líquido
    Título del producto
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