OPTIZYME™ EcoRI, Fisher BioReagents™

5'...G^A A T T C...3'
3'...C T T A A^G...5'

Condiciones para 100 % de actividad:

• 1 tampón OPTIZYME EcoRI: 50 mM Tris-HCl (pH 7.5 a 37 °C), 10 mM de MgCl2, 100 mM de NaCl, 0,02 % de Triton X-100 y 0,1 mg/ml de BSA.
• Incubar a 37 °C.

Suministrado con: 10 tampones OPTIZYME EcoRI
Actividad enzimática de los tampones OPTIZYME:

• Tampón 1: 0 - 20 %
• Tampón 2: Sin reacción
• Tampón 3: 100 %
• Tampón 4: Sin reacción
• Tampón 5: 100 %™

™La actividad estrella se produce con una sobredigestión de 5 veces la cantidad recomendable (5 unidades X 1 hora)
Tampón de almacenamiento:
10 mM de fosfato de potasio (pH 7.4 a 25 °C), 300mM de NaCl, 1 mM de EDTA, 1 mm de DTT, 0,2 mg/ml de BSA, 0.15 % de Triton X-100 y 50 % (p/v) de glicerol.
Ligadura y escisión:
más del 95 % de los fragmentos de ADN pueden ligarse y recortarse después de una sobredigestión de 50 veces la cantidad de EcoRI.
Digestión del ADN integrado en agarosa:
se requiere un mínimo de 5 unidades de EcoRI para completar la digestión de 1 μg de ADN lambda integrado en agarosa en 16 horas.
Nota: La baja concentración de sal, el exceso de la enzima, pH>8.0 o la sustitución del mg²⁺ por Mn²⁺ puede dar lugar a actividad estrella.
Extremos compatibles: XapI, MunI, TasI.
Efectos de la metilación:
Dam: nunca se superpone; ningún efecto.
DCM: nunca se superpone; ningún efecto.
CPG: puede solaparse; deterioro de la escisión.

• 5'...m5C GAATTm5C G...3'

3'... Gm5CTTAA Gm5...5'

EcoKI: nunca se solapa; sin efecto.

EcoBI: puede solaparse; sin efecto.

• 5'...TGm6AATTC(N)₄TGCT...3'

3'...AC TTAAG(N)₄m6ACGA...5'