Macherey-Nagel™ NucleoBond™ AX 10000, columnas Giga para ADN plasmídico de grado de transfección

NucleoBond™ Los kits de purificación de plásmidos incorporan NucleoBond™ Tecnología AX, un intercambiador de aniones a base de sílice desarrollado para la separación rutinaria de diferentes clases de ácidos nucleicos, lo que permite una actividad biológica superior de los ácidos nucleicos purificados y hace posibles recuperaciones de alta masa al minimizar los efectos de adsorción no específicos. Las bacterias recolectadas del caldo de cultivo se lisan mediante un procedimiento alcalino/SDS modificado. Tanto el ADN cromosómico como el plasmídico se desnaturalizan bajo estas condiciones alcalinas. El acetato de potasio se añade al lisado desnaturalizado, lo que causa la formación de un precipitado que contiene ADN cromosómico y otros compuestos celulares, lo que neutraliza el lisado. El ADN plasmídico, que permanece en solución, puede volver a su estructura nativa superenrollada. Después de equilibrar el NucleoBond™ En la columna AX, se aplica el lisado aclarado y el ADN plasmídico se une a la resina de intercambio aniónico. Después de los siguientes pasos de lavado, el ADN plasmídico purificado se eluye en un tampón con alto contenido en sal y se precipita con isopropanol. Por último, el ADN plasmídico se reconstituye en un tampón TE para su uso posterior. Alternativamente, NucleoBond™ El finalizador se puede utilizar para la concentración y la desalinización del ADN plasmídico eluido. NucleoBond™ Los filtros plegados (incluidos en los kits Midi [PC 100], Maxi [PC 500], Mega [PC 2000] y Giga [PC 10 000]) eliminan el paso de centrifugado después de la lisis alcalina. Los filtros reducen el tiempo de manipulación y eliminan los residuos plásticos comunes a otros sistemas de filtración. En aproximadamente 2 min (Midi) y 10 min (Maxi) de funcionamiento sin supervisión, se logra la eliminación completa de SDS y los residuos celulares de muestras plasmídicas. NucleoBond™ los filtros plegados no inducen el cizallamiento de construcciones de ADN grandes, como PAC o BAC. Tipos de kits y sus componentes: NucleoBond™ Mini (PC 20) - NucleoBond™ Columnas AX 20, tampones, ARNasa A. NucleoBond™ Midi (PC 100) - NucleoBond™ columnas AX 100, tampones, filtros plegados de ARNasa A. NucleoBond™ Maxi (PC 500) - NucleoBond™ Columnas AX 500, tampones, ARNasa A, filtros plegados XL. NucleoBond™ Mega (PC 2000) - NucleoBond™ Columnas AX 2000, tampones, ARNasa A, filtros plegados XL. NucleoBond™ Giga (CP 10 000) - NucleoBond™ AX 10 000 columnas, tampones, ARNasa A, filtros plegados. Para obtener más información sobre este producto, póngase en contacto con el servicio de atención al cliente.

• NucleoBond™ los filtros plegados eliminan el paso de centrifugado para una clarificación fácil, rápida y conveniente del lisado bacteriano
• Las columnas funcionan con flujo por gravedad, lo que permite la purificación de múltiples muestras en paralelo
• Intervalo de trabajo desde nanogramos hasta miligramos de ADN
• La recuperación del ADN plasmídico es > 90 %
• ADN para transfección
• Reproducibilidad entre lotes elevada
• Sin uso de disolventes orgánicos
• Precipitación con alcohol de ADN/ARN Purificación de ADN plasmídico de alto y bajo número de copias E. coli que sea adecuado para la transfección, la secuenciación y la clonación.